南方医科大学微生物实验报告概要.docVIP

2016年南方医科大学医学微生物学实验报告 日期 2016年5月22号 题目 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 成绩 实验者 作者：马浩楠 3140020007 参与者名字：马浩楠 丁超 王尧鑫 桂文茁 年级专业 2014级医学影像专业 指导老师 罗军 实验目的 1、掌握培养基制备的原则和一般方法。 2、掌握病原菌的分离与培养方法。 3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法，熟悉细菌基本形态。 4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。 5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。 6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法。 7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。 二、实验器材 1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml刻 度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯 2、脓汁标本1支，粪便标本1支；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个，伊红美蓝 平板2个，接种环，酒精灯 3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板） 4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1 本，载玻片4张，染色瓶，染色架 5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4 个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把 6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。 方法与步骤 1、培养基的制备： 培养基 称量干粉培 养基(g) 水量(ml) 煮沸(次） 分装(ml) 备注 营养琼脂 11.4 300 3瓶，500ml瓶，平板 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支×3，中试管，斜面 营养肉汤 1.3 60 1 3 20支×2，小试管，肉汤 半固体琼脂 1.7 60 3 4 14支×3，小试管，高层 （1）（2）（3）（4） 图片分析：由于同学都是第一次划线，所以划线都不是很好。 细菌的纯培养： 在斜面培养基上得到四种菌体的纯培养标本，从普通平板上挑取的黄色 或白色菌落接种的斜面，菌苔的颜色，还是原来菌落的颜色，黄色或白色。 从伊红美蓝平板上挑取的紫黑色或粉红色菌落接种的斜面，菌苔已经没有原来菌落的颜色。菌苔灰白色、表面湿润、光滑、前者不透明，后者透明。 图片分析：中间两组效果不好，可能来自于采菌过少或者划线操作不当 细菌的形态学检查: 脓汁标本（左边为白色菌苔，右图为金黄色菌苔） 粪便标本（左图为粉红菌苔，右图为紫黑色菌苔） 镜下观察： 用普通平板，从浓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落，这两株细菌，显微镜 油镜下均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌。结合菌落色素，这两株葡萄球菌可能是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。 用伊红美蓝平板，从粪便标本分离、获得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。紫黑 色菌落可能是能分解乳糖的非致病菌大肠埃希菌。粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。显微镜下，均为G-杆菌，散在排列，从形态上不能鉴别是什么细菌。 细菌的生化试验等: （1）半固体穿刺接种法 图片分析：实验效果与预期一致，但是拍摄效果不是很好。 四组的半固体培养接种的培养图，由于拍摄效果不好，但是依然可以分辨生长的情况。 直线生长的表明无鞭毛。 细菌的糖发酵试验 糖发酵实验结果图.从下至上分别为： （④粉红→乳糖③粉红→葡萄糖 ②紫黑→乳糖 ①紫黑→葡萄糖） 编号 菌苔 糖发酵管 反应现象 结果描述 符号 甲 紫黑 ( 糖发酵管变黄色有气泡 分解X糖产酸又产气 ⊕ 乙 紫黑 ( 糖发酵管变黄色有气泡 分解X糖产酸又产气 ⊕ 丙 粉红 ( 糖发酵管变黄色无气泡 分解X糖产酸不产气 + 丁 粉红 ④ 糖发酵管变紫色无气泡 分解X糖产酸不产气 - +：产酸或阳性 ⊕：产酸产气 -：阴性 紫黑细菌微型发酵关内液体变黄，产生气泡，气泡的高度分别为10mm和17mm，说明紫黑色菌苔既分解葡萄糖也分解乳糖，产酸产气；粉红细菌只分解葡萄糖，不产气，不分解乳糖。 (3)抗菌素敏感试验结果: 图片分析：.3号同学划线最好，本人4号划线不好，还是没有划好。2号同学效果不好，可能取菌过少。 4：浓汁标本中白色菌落3：浓汁标本中金黄色菌落 2：粪便标本中粉色菌落1：粪便标本中紫黑色菌落 药敏试验结果分析