3-生理.ppt

主动运输（ active transport） 低浓度到高浓度。 借助于特异性载体蛋白。 膜内外亲和力不同，膜外大，膜内小。 消耗能量ATP。 可以进行逆浓度运输。 微生物吸收营养物质的主要方式：有机离子、无机离子和一些糖类，eg：K+、AA、葡萄糖。 运输物质所需能量来源： 好氧型微生物与兼性厌氧微生物直接利用呼吸能； 厌氧型微生物利用化学能（ATP）； 光合微生物利用光能； 嗜盐细菌通过紫膜（purple membrane）利用光能。 基团移位（group translocation） 低浓度到高浓度。 载体蛋白。 膜内外亲和力不同。 消耗能量。 化学修饰，溶质在运送前后会发生分子结构的变化。 主要用于葡萄糖、果糖、甘露糖、脂肪酸、核苷、碱基等的运输。 以大肠杆菌运输葡萄糖的过程为例：每输入一个葡萄糖分子，消耗一个ATP的能量。运送机制是依靠磷酸转移酶系统。 1、热稳定载体蛋白（heat-stable carrier protein，HPr）的激活：HPr是低分子量可溶性蛋白，结合于细胞膜上，酶1是可溶性的细胞质蛋白。 PEP + HPr →酶1 → 丙酮酸 + P—HPr 2、糖被磷酸化后运入膜内。 P-HPr + 糖 → 酶2 → 糖-P + HPr，酶2为外膜上的特异性蛋白，具底物特异性，不同的底物有不同的被诱导出的酶。 培养基 培养基（medium）是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合养料。 培养基的主要用途为：促使微生物的生长与繁殖、用于微生物纯种的分离、鉴定和生产微生物制品等。 培养基几乎是对一切微生物进行研究和利用工作的基础。 培养基的配制原则 1、满足微生物的营养需要 （1）碳源，氮源，无机盐，生长因子，水。 （2）一般细菌为肉汤或普通琼脂培养基。 （3）特殊细菌（链球菌，淋病双球菌，肺炎球菌，流感嗜血杆菌）血清培养基。 2、营养协调，控制比例。 （1）C/N摩尔数之比直接影响到微生物的生长繁殖、代谢物的积累和菌体按比例吸收营养物质。 （2）氮源过多，菌体生长旺盛，pH高不利于代谢产物积累；氮源少，菌体积累量少。 （3）碳源过多，pH低，碳源不足，易引起菌体衰老自溶。 （4）一般培养基C/N为100/0.5-2 谷氨酸发酵培养基C/N为100/11-21 放线菌蛋白酶培养基C/N为100/10-20 3、合适的pH （1）最适生长pH和最适产物合成的pH，两者有差异。 （2）细菌，放线菌pH7.0-7.6。 （3）霉菌、酵母菌pH4.5-6.0。 （4）微生物在生长繁殖和分泌代谢产物的过程，培养液则会发生变化。 eg：AA生产，pH下降；大肠杆菌培养pH升高 （5）生理酸性、生理碱性物质，eg：Na2CO3，（NH4）SO4，CaCO3等。 （6）发酵时直接流加酸碱（HCl，NH3·H2O）。 4、适宜的物理状态； 5、培养基必须经灭菌后方可使用，保证纯种培养。 培养基的种类 根据培养基成分划分 天然培养基：利用动植物或微生物或其提取物制成的培养基，化学成分还不十分清楚或化学成分不恒定。 合成培养基：由已知化学成分及数量的化学药品配置而成。 半合成培养基：以天然有机物为主要碳源、氮源及生长素的培养基中加入已知成分的无机盐，使其更能充分满足微生物对生长的需要。 原材料 制作特点 营养价值 牛肉膏 瘦牛肉加热、抽提浓缩成的膏状物。 主要提供碳水化合物（有机酸、糖）、有机氮（氨基酸、嘌呤等）、无机盐（钾、磷等）和B族维生素等。 蛋白胨 酪素、明胶、鱼粉等经酸解或酶解而成。 主要提供有机氮、维生素和碳水化合物等。 酵母膏 酵母细胞水提物浓缩而成。 可提供大量的B族维生素、氨基酸、嘌呤和微量元素。 玉米浆 亚硫酸浸泡玉米粉制备淀粉时的废液，经减压浓缩而成。 提供可溶性蛋白质、多肽、小肽、氨基酸、还原糖和B族维生素（尤其生物素）。 糖蜜 甘蔗和甜菜制糖后的下脚料。 主要提供蔗糖和其他糖，还有氨基酸、有机酸、少量的维生素。 根据培养基的物理状态划分 （1）固体培养基 琼脂培养基：液体培养基加1.5%-2%琼脂，用于菌种保藏、固体发酵、纯种分离、菌落特征观察以及活细胞计数等方面。 明胶培养基：明胶添加量5％-12％，常制成高层培养基，用于菌种鉴定。 硅胶培养基：特殊制法，用于自养微生物分离培养。 天然固体培养基：用天然的麸皮、米糠、玉米粉、马铃薯块等制备，用于真菌培养和有机酸发酵。 琼脂作为凝固剂的优越性 1、不被微生物分解利用：琼脂成分为多糖类物质硫酸半乳糖，不为微生物分解液化； 2、在微生物的生长温度（25-37℃）内保持固态：琼脂凝固温度45℃，明胶凝固温度22℃； 3、凝固点的温度对微生物无害； 4、琼脂在9