植物基因程载体及其构建.ppt

第八章?????植物基因工程载体及其构建 第一节???植物基因工程载体种类 第二节???根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能 第三节???Ti质粒基因转化机理 第四节???Ti质粒的改造及载体构建 第五节???常用选择标记和报告基因 植物基因转化系统 l? 1.载体转化系统（Ti质粒转化载体、Ri质粒转化载体、病毒转化载体） l???2.?DNA直接导入转化系统（原生质体、基因枪） l? 3.种质转化系统（花粉管通道法、生殖细胞浸泡法、胚囊子房注射法）。 载体转化系统是目前植物基因工程中使用最多、机理最清楚、技术最成熟的、最重要的一种转化系统, 其中又以Ti质粒转化载体最为重要。 第一节 植物基因工程载体种类 根据其功能和构建过程，可分为以下种类。 （1）目的基因克隆载体：其功能是保存和克隆目的基因。与微生物基因工程相似，通常是由多拷贝的E. Coli小质粒为载体。 （2）中间克隆载体：是构建中间表达载体的基础质粒。是由大肠杆菌质粒插入T-DNA片段、目的基因和标记基因等构建而成。 （3）中间表达载体：是含有植物特异启动子的中间载体。是构建转化载体的质粒。 （4）卸甲载体：是解除武装的Ti质粒或Ri质粒，是构建转化载体的受体质粒。 （5）植物基因转化载体：是最后用于目的基因导人植物细胞的载体，亦称工程载体。它是由中间表达载体和卸甲载体构建而成。 第二节 根癌农杆菌