柱层析在多糖分子量分布测定的应用方案细节 组员:叶绍锋、周靖波、黄皓晖、梁三威、丘式浚 指导老师:廖劲松 柱层析技术(chromatography) 柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。 柱层析测定多糖分子分布量原理 多糖为单糖的天然聚合物, 多糖的性质和药理作用与其分子量大小, 分子量分布及其结构密切相关。多糖的分子量不是均一的, 具多分散性, 需要用统计方法表征其平均分子量及其分子量分布。高效凝胶色谱法测定多糖的分子量及其分布, 具有快速, 重现性好等优点,在国内外得到了广泛的应用 案例分析: 多花黄精多糖 云芝多糖 虫草多糖 高效凝胶色谱法测定多花黄精多糖分子量与分子量分布 多花黄精多糖为水溶性多糖, 针对其单糖组成和空间结构与葡聚糖相似, 在色谱柱的选择上倾向于更适合于水溶性多糖分离测定用的Shodex OH Pak SB-803H Q 系列(对葡聚糖的排阻极限为1 ×105) 操作流程 1.色谱条件 色谱柱为Sho dex OH Pak SB-803HQ , 流动相为0.71 %硫酸钠溶液(内含0.02 %叠氮钠), 柱温:35 ℃, 示差折光检测器(检测器温度35 ℃),
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