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1-丙氨酸氨基转移酶测定程序（速率法） 一、原理：ALT催化L-丙氨酸的氨基转移至α-酮戊二酸，生成丙酮酸和L-谷氨酸。LDH催化丙氨酸还原的同时将NADH氧化成NAD+。NADH吸光度的下降速率和ALT的活力成正比。 IFCC推荐法含磷酸吡哆醛（P-5-P），是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。健康人血清中磷酸吡哆醛含量适中，国内试剂一般不含磷酸吡哆醛。 化学反应式 二、临床意义 1 ALT存在于各种组织细胞内，以肝细胞中含量最多，正常时血清中ALT活性很低。 2 肝细胞因感染病毒而受损伤，尤其是处于急性期时，ALT从细胞内逸出至血液中，血清中ALT活性可明显升高，因此是各种肝炎患者检查的一个重要指标。 3 某些药物对肝细胞有毒性副作用，过量或长期使用可至肝脏受损，亦可以ALT活性升高反映 4 实质性脏器有非感染性炎症或损伤时，如脂肪肝、梗阻性黄疸、肝内胆汁瘀滞、胆管炎、胆囊炎、肝癌、急性心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时的肝脏淤血等，均可成为血清ALT升高的原因。 4 ALT与AST联合测定并计算其比值有助于对某些疾病的鉴别，正常情况下ALT／AST比值小于1，但在传染性肝炎及其它原因引起的肝脏炎症时，ALT／AST比值升高；肝硬化、肝癌、进行性肌营养不良、皮肌炎时，AST升高的幅度高于ALT。 三、结果计算：ALT (U/L) ＝ 四、医学决定水平 1 20U/L 此为排除值，低于此值可排除许多与ALT升高有关的病种，而考虑其他诊断。此值可以作为病人自身的ALT的对照，与过去和（或）将来的值进行比较。 2 60U/L 高于此值时，对可引起ALT增高的各种疾病均应考虑，并应进行其他检查以求确诊。 3 300U/L高于此值通常与急性肝细胞损伤有关，如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝性休克等，而酒精性肝炎的ALT往往低于此值，其他如传染性单核细胞增多症、多肌炎等也都往往低于此值。 五、方法的有限性及干扰因素 1、血红蛋白5.0g/L、胆红素427μmol/L、甘油三酯5.7mmol/L无明显干扰。 2、磷酸吡哆醛能使血清中ALT显示最大活性，使用不含有磷酸吡哆醛试剂测定ALT活性，某些疾病患者如肾脏病患者，可因血清中磷酸吡哆醛含量不足而致ALT活性低估。 2-门冬氨酸氨基转移酶测定程序（速率法） 一、原理：酶学速率法测定天冬氨酸氨基转移酶的活性。在该反应中，天冬氨酸氨基转移酶可逆性催化转氨基反应，即将L-天冬氨酸和α-酮戊二酸转变为草酰乙酸和L-谷氨酸。草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH）存在的情况下被还原为苹果酸，同时将还原型的β-尼克酰胺腺嘌呤二核酐酸（NADH）氧化。分析仪检测340/410nm的吸光度变化。这一变化与样品中的天冬氨酸氨基转移酶的活性成正比。进而计算出该酶的活性。 化学反应式 L-天冬氨酸+ α-酮戊二酸 AST 草酰乙酸+ L-谷氨酸 草酰乙酸+NADH + H+ MDH 苹果酸+NAD+ 二、临床意义 1 AST存在于各种组织细胞内，肝、心、肾组织中的含量较多，正常时血清中AST活性很低。 2 与ALT相比，AST分子小，血浆中半衰期较短。肝细胞受损时，血清中AST水平变化早，恢复快，但升高幅度不如ALT。 3 慢性肝炎、肝硬化时AST往往高于ALT，因此用作判断肝炎痊癒指标AST更有意义。 4 正常人AST/ALT比值为1.15，此比值变化对急性肝炎的预后判断有意义。急性肝炎时此比值＜1，病情好转时恢复正常，比值增大有转为慢性可能，慢性活动性肝炎、肝硬化和肝癌时此比值明显升高。 5 实质性脏器有非感染性炎症或损伤时，如脂肪肝、梗阻性黄疸、肝内胆汁瘀滞、胆管炎、胆囊炎、肝癌、急性心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时的肝脏淤血等，血清AST伴随ALT共同升高，但幅度较低。 6 AST在心肌细胞内含量较多，当心肌梗死时，血清中活性增高，在发病后6-12小时内显著升高，48小时达高峰，约在3-5天恢复正常。 三、结果计算：AST (U/L) ＝ 四、医学决定水平 1 20U/L 此为排除值，低于此水平时可排除多种与AST增高有关的疾病。应考虑其他的诊断。这个参考范围内的值还可作为病人自身对照，可与过去和（或）将来的测定值进行比较。 2 60U/L 超过此水平时，多种与AST增高有关的疾病均应加以考虑，如肝细胞损伤、心肌梗塞、肌肉与骨骼疾患，肝后胆道阻塞等，此时同时测定ALT、ALP、TBIL、CK等鉴别是肝脏疾病还是心肌疾患有重要意义。3 300U/L高于此值通常为急性肝细胞损伤，如病毒性肝炎、中毒性