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第9章 复制 replication DNA dependent DNA polymerase——DDDP DNA dependent RNA polymerase——DDRP RNA dependent RNA polymerase——RDRP RNA dependent DNA polymerase——RDDP DNA复制 1、复制可以随机起始吗? 2、复制是单向的还是双向的? DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段,即复制起始点(origin) 。 在原核生物中,复制起始点通常为一个,而在真核生物中则为多个。 习惯上把两个相邻DNA复制起始点之间的距离(或DNA片段)定为一个复制子(replicon) 。 复制起始点、复制子与复制叉(动画演示) 1、新生链合成的方向是从5’to 3 ’ 还是3 ’to 5’,还是两个方向均可? 2、两条链是同时进行复制的吗? DNA聚合酶不能从头合成DNA。这就必然需要引物 原料:dNTP 模板:DNA单链 引物:3’-OH引物 酶和蛋白质因子 一、原料(substrate) 以四种脱氧核糖核酸(deoxynucleotide triphosphate)为原料,即dATP,dGTP,dCTP,dTTP。 解螺旋酶(helicase) 每解开一对碱基,需消耗2分子ATP。 单链DNA结合蛋白 (single strand DNA binding protein, SSB) 五、DNA拓扑异构酶 六、DNA聚合酶 全称:依赖DNA的DNA聚合酶 ( DNA-dependent DNA polymerase, DDDP ) 简称:DNA-pol 活性:1. 5??3? 的聚合酶活性 2. 核酸外切酶活性 在原核生物中 这三种酶都属于具有多种酶活性的多功能酶。 参与DNA复制的主要是pol Ⅲ和polⅠ。 聚合一段RNA短链引物(primer),以提供自由的3’-OH,使子代DNA链能够开始聚合。 注释: 体内仅存在5’ 3’的DNA聚合酶 第二节 DNA复制过程 Section 2 The Process of DNA Biosynthesis 一、复制起始 第四节 逆转录 Section 4 Reverse Transcription 逆转录:以RNA为模板合成DNA的过程。 RNA病毒有: 艾滋病病毒,烟草花叶病毒,SARS 病毒 A/H1N1流感 一、逆转录病毒和逆转录酶 第三节 DNA的损伤与修复 section 3 DNA Damage and Repair 一、突变的意义 三、突变的分子改变类型 某 蛋白质 解旋酶 拓扑 异构酶 SSB 引物酶 识别复制的起始序列 在ATP的作用下将DNA双链解开形成单链 消除DNA解链过程中所产生的扭曲力 新解链的DNA保持稳定结构 为DNA复制提供RNA引物 5 3 5 dATP dGTP dTTP dCTP dTTP dGTP dATP dCTP OH 3 3 DNA-pol 二、复制的延长 3’ 5’ 5’ 3’ AATGGCCGAT TTACCGGCTA 领头链的合成过程 随从链的合成过程 DNA复制过程简图 5? 5? 5? RNA酶 OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 三、复制的终止 人的端粒DNA序列:(TTAGGG)n (1)稳定染色体结构 (2)防止染色体末端融合 (3)保护染色体结构基因 (4)避免遗传信息在复制过程中丢失 附:端粒长度----分子钟(molecularclock) 的作用 随着细胞不断分裂,端粒的长度越来越短,当 达到一个临界长度,细胞染色体即失去稳定性, 阻止细胞进一步分裂的信号便发出。细胞将发 生凋亡(apoptosis) 逆转录病毒细胞内的逆转录现象: RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA 依赖RNA的DNA聚合酶活性 RNA酶活性 依赖DNA的DNA聚合酶活性 DNA损伤 内环境 化学 物理 基因型改变, 表现型不变 疾病 产生 进化的基础 死亡 二、引起突变的因素 自发脱碱基:每日可达近万 1 自发脱氨基:每日几十到几百个 2 复制错配 3 自发 (二)物理因素: (三)化学因素: 亚硝酸与亚硝酸盐 氮芥类 5-FU,6-MP 苯并芘 溴乙锭 阿霉素 脱氨剂 烷基化剂 碱基类似物 DNA加
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