菌种选育、保藏与复壮1.pptVIP

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  • 2016-11-26 发布于广东
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诱变育种的基本过程如下: 出发菌株的选择 一是考虑出发菌株是否具有特定生产性状的能力或潜力,即菌株是否具有产生特定代谢产物的催化酶系的基因。 自然界直接分离到的野生型菌株 经历过生产条件考验的菌株 已经历多次育种处理的菌株 菌株来源 其次是出发菌株最好已具备一些有利的性状,如生长速度快、营养要求低和产孢子早而多的菌株。 出发菌株的选择 待处理的菌悬液应考虑微生物的生理状态、悬液的均一性和环境条件。 一般要求菌体处于对数生长期,并采取一定的措施促使细胞处于同步生长。 悬液的均一性可保证诱变剂与每个细胞机会均等并充分地接触,避免出现不纯的菌落,给后续的筛选工作造成困难。 制备菌悬液 制备菌悬液 用玻璃珠振荡打散细胞团,再用脱脂棉花或滤纸过滤,得到分散的菌体。 产孢子或芽孢的微生物最好采用其孢子或芽孢。 真菌孢子或酵母细胞106?107个/ml,放线菌或细菌108个/ml。菌悬液一般用生理盐水(0.85%NaCl)稀释。 菌悬液的细胞浓度一般控制为: 在诱变处理前,一般应预先做诱变剂用量对菌体死亡数量的致死曲线,选择合适的处理剂量。 合适诱变剂量的选择 就一般微生物而言,突变率随剂量的增大而增高,但达到一定剂量后,再加大剂量反而会使突变率下降。现在致死率一般在70%-80% 。 诱变处理

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