第八章非线性色谱学案.pptVIP

第八章 非线性色谱原理及其在蛋白分离纯化中的应用 韶关学院生命科学院 第一节 概述 生物制品的分离纯化对产品质量具有重要的意义。传统方法由于效率低，费时，劳动强度的等原因，已经不使应现代生物技术发展的要求。 色谱技术自1903年俄国植物学家Michael Tswett发现并命名以来，不断改进，在生物产品的制备中使用日臻。1950s出现气相色谱，1960s制成了自动化的色谱仪，使色谱方法在制备和分析领域得到更广泛的应用。 一、色谱法的基本特点 1、分离效率高 理论踏板的高度仅相当1-2个固定相的高度。HPLC的色谱柱短到3-20cm，就能分离多达几十种分子。 2、应用面广 从无机物到有机物，小分子到大分子，热敏感到热不敏感的分子均适用。特别适宜用于生物样品的纯化与复性。 3、操作参数多 按固定相、流动相及洗脱液组成性质不同，色谱有许多种的分类和亚类，适用于各种分子分离。 4、高灵敏度在线检测 HPLC均带检测装置。 5、快速分离 带有加压系统，是分离速度加快，时间缩短。 6、连续自动化 计算机技术的植入，使HPLC实现连续进样、洗脱、收集，且高度自动化。 二、线性色谱与非线性色谱 线性与非线性是数学函数的概念，描述自变量和应变量之间的关系。 在色谱学上，如果流动相与固定相中的样品浓度Cm与Cs之间呈线性关系，此时的色谱分配过程就是线性色谱。 即 Cs