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第九章 细胞凋亡与疾病 第一节 概 述 细胞凋亡与坏死的比较： 研究简史 半个世纪前:人们就观察到生理自发退化死亡现象. 1965年:发育生物学家Lockshin和Williams首先提出了PCD（程序化死亡）一词，用于描述蛾的发育过程 1972年:Kerr等首次提出了细胞凋亡的概念 1977年:人们注意到在生理或病理性刺激条件下，淋巴细胞发育过程中的凋亡现象。 1980年:Wyllie研究胸腺细胞在糖皮质激素作用下引致的细胞凋亡变化，总结并建立了细胞凋亡的共同形态学特征，包括核固缩和DNA降解成寡核苷酸片段等 1989年: 0wen及其研究小组在研究胸腺细胞阴性选择过程中证明了信号传递物质对PCD的调控作用。 1991年:Ellis首先发现了线虫(C.elegans)体内Ced-3、4两个基因与PCD的发生密切相关，随后逐渐发现了多种参与PCD的正相调节基因和负相调节基因 细胞凋亡的生理病理意义： ①确保正常发育、生长：清除多余的、失去功能价值的细胞（指趾间组织细胞） ②维持内环境稳定：清除受损突变细胞，自身反应细胞，衰老细胞 ③发挥积极的防御功能：感染病毒细胞凋亡，阻止病毒复制 第二节 细胞凋亡的过程与调控 凋亡的四个阶段： apoptosis apoptosis 二、凋亡时细胞的主要变化 apoptosis 凋亡时细胞的形态学改变 （二）细胞凋亡的生化改变 内源性核酸内切酶激活及其作用：内源性核酸内切酶在核小体连接部切断DNA双链。 凋亡诱导因素→细胞内信号转导 无活性内源性核酸内切酶 活性内源性核酸内切酶 →核小体连接部切断DNA双链→电泳呈特征性的“梯状”条带 Caspase的激活及其作用： Caspase（含半胱氨酸的门冬氨酸特异水解酶）：一组对底物门冬氨酸部位有特异水解作用，其活性中心富含半胱氨酸的蛋白酶 主要作用： ①灭活细胞凋亡抑制物（Bcl-2） ②水解蛋白质结构，导致细胞解体，形成凋亡小体 ③水解级联反应相关活性蛋白，使之获得或丧失某种生物学功能 Caspase的作用 三．细胞凋亡的调控 抑制性因素： (二)细胞凋亡信号转导 研究较多的系统： 2．cAMP/PKA信号系统（cAMP为第二信使） 3．Fas蛋白/Fas配体信号系统 4．神经酰胺信号系统 神经酰胺：神经鞘磷脂（SM）在神经鞘磷脂酶的作用下产生的一类新型第二信使物质。 介导细胞凋亡的依据：用天然神经酰胺处理u937白血病细胞，诱导细胞凋亡 神经酰胺途径相关诱因：电离辐射、TNF-α、Fas抗原、糖皮质激素 5．二酰甘油/蛋白激酶C（PKC）信号系统 二酰甘油：磷脂酰肌醇和磷脂酰胆碱在磷脂酶C催化下产生的一种第二信使物质。 依据： ①活化的PKCβ1可诱导u937白血病细胞凋亡 ②抑制PKC活性可抑制糖皮质激素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡 ③PKC激动剂佛波脂可抑制某些类型细胞凋亡（糖皮质激素、T细胞受体激活、IL-2撤除） 6．酪氨酸蛋白激酶系统 生长因子或细胞因子→激活酪氨酸蛋白激酶→靶蛋白酪氨酸磷酸化→Ras蛋白激活→通过Raf-1、MAPKK、MAPK→蛋白质磷酸化→细胞分化 生长因子或细胞因子撤除→不能激活酪氨酸蛋白激酶系统→细胞凋亡 （三）凋亡相关基因 三类： 抑制凋亡基因：Bcl-2、EIB、IAP 促进凋亡基因：P53、Bax、ICE 双向调节基因：c-myc、Bclx (B细胞淋巴瘤/白血病-2[B cell lymphoma / leukemia-2]基因的缩写) Bcl-2蛋白：229个氨基酸（人）、236个氨基酸（小鼠） 分布：线粒体内膜、细胞膜内膜、内质网、核膜 作用：Bcl-2高表达能阻抑多种凋亡诱导因素所引起的细胞凋亡 依据： ①导入Bcl-2基因质粒可防止神经细胞因撤除神经生长因子所诱导的凋亡 ②淋巴细胞有20%呈Bcl-2阳性时，预后不佳（耐受放射线、抗癌药物） 1.Bcl-2 ①直接的抗氧化作用 ②抑制线粒体释放促凋亡蛋白质（细胞色素C、AIF） ③抑制促凋亡性调节蛋白质Bax、Bak的细胞毒作用 ④抑制凋亡蛋白酶（caspases）的激活 ⑤维持细胞钙稳态 Bcl-2抗凋亡作用机制： 作用： 野生型（wtP53）：DNA结合蛋白，诱导细胞凋亡（“分子警察”） 突变型（mtP53） ：抑制细胞凋亡 野生型P53的作用机制：P53蛋白→细胞周期G1期检查染色体DNA损伤（检查点功能）→发现DNA损伤→剌激CIP的表达→阻止细胞进入下一周期，启动DNA修复机制→修复失败→启动细胞凋亡机制→细胞凋亡 2.P53 c-myc: 一种癌基因，它能诱导增殖，也能诱导细胞凋亡，具有双向调节作用。 作用机制：c-myc蛋白为重要的转录调节因子，既可介导