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- 2016-11-26 发布于湖北
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第一节 引言 蛋白质存在于一切生物体中,是非常重要的生物大分子。蛋白质是生物功能的执行者,担负着生物催化、物质运输、运动、防御、调控及记忆、识别等多种生理功能。 一、分离纯化的意义 ①从生物材料中分离制备蛋白质,研究其结构与功能,对于了解生命活动的规律,阐明生命现象的本质有重大意义。 ②工业生产的需要:食品、发酵、纺织、制革等工业,需要大量的高活性的酶制剂。如用淀粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以及糖浆等。 ③医疗的需要:如用猪胰岛素治疗糖尿病。 ④基因工程的需要 二、分离纯化的要求 1、纯度:主要取决于研究的目的和应用上的要求。如作为研究蛋白和一级结构、空间结构,一级结构与功能的关系的蛋白质制剂、工具酶和标准蛋白、酶法分析的酶制剂,都要求均一;工业、医药方面应用的酶和蛋白质制剂,达到一定纯度即可,不要求均一。 2、活性:要求大分子保持天然构象状态,有高度的生物活性。 3、收率:希望收率越高越好,但在分离纯化过程中总有不少损失。而且提纯步骤越多,损失越大。 三、分离纯化的一般程序 蛋白质分子的分离纯化一般可分为以下几个阶段: ①材料的选择和预处理 ②破碎细胞及提取(有时还需要进行细胞器的分离) ③分离纯化:包括粗分级分离和细分级分离 其中前两个阶段为分离纯化的前处理。 第二节 蛋白质分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 选择材料主要根据实
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