第一章紫外-可见吸收光谱法w技巧.ppt

光 谱 (Spectrum) 光谱是复色光经色谱分散系统分散后，按波长大小依次排列的图像。 基于测量物质的光谱而建立起来的分析方法称为光谱分析法。 例3：以下四种化合物中，能同时产生B吸收带、K吸收带、R吸收带的是： 共轭多烯的紫外吸收 β-胡萝卜素与蕃茄红素： 1.2.2 吸光系数 百分吸光系数(比吸光系数) 在一定的λ下，溶液浓度为1％（即1g/100ml），液层厚度为1.00cm时的吸光度，用 表示。 (1) 与样品有关的因素 (1) 与样品有关的因素 2.单波长双光束分光光度计 （四）. 显色条件的确定 1.4.4 共存干扰离子的消除 1.4.4 共存干扰离子的消除 1.4.4 共存干扰离子的消除 1.5 紫外-可见吸收光谱的应用 紫外-可见吸收光谱法主要用于化合物的定量分析 灵敏度高：测定下限可达10-5～10 -6mol·L-1, 准确度：能够满足微量组分的测定要求，相对误差2～5％ 作为四大波谱之一，是鉴定许多化合物，尤其是有机化合物的重要定性工具之一。 解: ⒈ 了解样品特性(如：含量或溶解性等); ⒉ 选择光度分析体系(显色剂或衍生试剂等)； ⒊ 确定样品称取量，配制样品储备液(根据光度测定的误差对吸光度的要求)； ⒋ 吸收光谱的测定，确定测量波长； ⒌ 显色条件的优化(显色剂用量、溶液酸度、显色温度与时间、干扰及其消除等)； ⒍ 配制标准溶液，绘制标准曲线； 7.配制样品溶液，计算样品含量。 3. 样品测定步骤 * 由此可计算某能量对应的波长，或某波长对应的能量，比如5eV对应的波长为：λ = hc/ΔE = 4.136×10－15eV?s×2.998×1010cm?s－1/5eV = 2.48 ×10－5cm= 248nm * （1）.测量波长的选择 “吸收最大，干扰最小” A ? X ?max Y 1.4.1 仪器测量条件 一般选择最大吸收波长 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 0.7 0.4 0.2 0.1 A T% Er (36.8) 0.434 浓度测量的相对误差与T(或A)的关系 实际工作中，应控制A在0.2～0.8之间 —调节溶液浓度 —选用适当厚度的吸收池 （2）. 吸光度读数范围的选择：　 最佳值 最佳读数范围 【例】某一有色溶液在2.0cm的吸收皿中，测得透光率T＝1％，若仪器透光度的绝对误差△T＝0.5％，计算 （1）测定的浓度的相对误差△c/c （2）为使测得吸光度在最适读数范围内，溶液应稀释或浓缩多少倍？ （3）若浓度不变，而改变比色皿厚度（0.5cm, 1.0cm，2.0cm,3.0cm）,则应选择那种厚度的吸收皿最合适，此时△c/c为多少？ 解：（1） （2）A=-lgT=-lg1%=2 设有色溶液原始浓度为co，当b一定时，A＝εbc＝K?c,要使A＝0.2～0.8，则 即稀释2.5～10倍 （3）当c一定时，A＝εbc＝K?b,要使A＝0.2～0.8，则 bo=2cm 所以，b=0.5cm最合适，此时： （一）. 显色反应 主要有配位反应(为主)、氧化还原反应和衍生化反应。 mX(待测物)＋nR(显色剂)＝XmRn(有色化合物) 1.4.1 反应条件的选择 用于吸光系数值较小的金属离子和有机化合物 配位显色反应 当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生电荷转移跃迁，产生很强的紫外—可见吸收光谱。（P34 表3.3） 氧化还原显色反应 例如：钢中微量锰的测定，Mn2＋不能直接进行光度测定 2 Mn2＋ ＋5 S2O82-＋8 H2O =2 MnO4- + 10 SO42-＋ 16H+ 将Mn2＋ 氧化成紫红色的MnO4-后，在525 nm处进行测定。 （二）.显色反应的选择 *灵敏度高，一般ε104，选择性好 *对照性好,显色剂在测定波长处无明显吸收。?λmax60 nm . *反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。 *显色条件易于控制，重现性好。 （三）. 显色剂 ： ： ： ： 助色团：－NH，－OH，－X (孤对电子)ne O 生色团：－N＝N－，－N＝O， O C=S,－N （共轭双键）πe 无机显色剂: SCN- [Fe(SCN)]2+ H2O2 [TiO·H2O2]2+ 有机显色剂: 要求：有色化合物与显色剂之间的颜色差别应尽可能大。 ?R A ? MR R ?MR Fe3+ + 磺