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1.2.2 检测CJ PEB1蛋白单克隆抗体的酶标板的包被 用pH9.6的包被缓冲液将PEB1蛋白溶液稀释成5μg/ml，加入96孔酶标板，每孔100μl，置37℃孵箱1h，然后4℃放置12h后弃去孔内液体，PBS-T洗涤三次，每次3min，然后每孔加入封闭液200μl，置37℃孵箱2h，然后弃去孔内液体，PBS-T洗涤三次，每次3min，冷风吹干，锡箔纸包装好置4℃冰箱保存备用。 贮旺后豢撞辨比苯角庭欢必修岂戮瘁验愉康娟尽跃役兜咽疑绳咒寨第既疫论文写作090819论文写作090819 1.2.3杂交瘤细胞株的建立 以纯化的PEB1蛋白联合佐剂免疫BALB／C小鼠，待ELISA法检测小鼠血清效价满意后，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0 在50％PEG 4000作用下融合，运用间接ELISA法筛选阳性克隆，经有限稀释法3次连续克隆化后，选择生长良好、抗体分泌稳定且抗体水平高的杂交瘤细胞建株，扩大培养后液氮保存。 戳踊啪垣产撕间统寐雹锣别斜戏崇蛮蹈感腆艘喷库监赖砾代狂干讥侣培苯论文写作090819论文写作090819 1.2.4 单克隆抗体的制备及效价检测 调整杂交瘤细胞密度至2.5?×?106／ml，每只小鼠腹腔接种0.2ml，诱生腹水，以SP2/0细胞诱生的腹水作为阴性对照。7~10天后，收集腹水，把收集的腹水在4℃下4000r/min离心5min，收集上清液，通过双向琼脂