4第四章外植体的接种和培养.pptVIP

第一节 外植体的接种 1 接种室的消毒 无菌操作室的地面、墙壁和工作台的灭菌可用2%的新洁尔敏或70%的酒精擦洗，然后用紫外灯照射约20min。 使用前用70%酒精喷雾，使空间灰尘落下。 一年中要定期一、二次用甲醛和高锰酸钾熏蒸。 2 外植体的接种 接种：是把经过表面消毒后的植物材料切碎或分离出器官、组织、细胞，并将它们转放到无菌培养基上的全部操作过程。 第二节 培养方法 1 固体培养 优点: 简单，应用广泛，一般只要有培养室及接种箱即可开展工作。 缺点: 外植体或愈伤组织只有底部表面接触培养基，吸收养分，造成各部分营养浓度差异，影响生长。 外植体插入培养基后，气体交换不畅及排泄物质积累，影响组织吸收和造成毒害。 受光不均匀，生长不一致。 2．液体培养 分静止培养和振荡培养： 2.1 静止液体培养 优点：培养基中不出现营养物浓度差异的现象，可以用来进行许多营养方面的研究工作。 静止培养不需增添专门设备，适合于某些原生质体培养； 1）25±2oC。 2）植株种类及外植体的不同，其最适温度也是不同的。 如百合20℃；月季25-27℃；番茄28℃。 低于15?C或高于35?C，对生长都是不利的。 1 褐变的原因 2 影响褐变的因素 3 褐变的预防措施 2.1 植物材料 （1）基因型 不同种植物，同种植物不同类型、不同品种在组织培养中褐变发生的频率、严重