小鼠精子蛋白Sp17的原核表达及其免疫效应.docVIP

文章编号： 小鼠精子蛋白Sp17的克隆、表达及其免疫原性研究 张巧玉1 ,2 梁志清1 李玉艳1 李晋涛3 史常旭1(1第三军医大学西南医院妇产科，重庆400038,2解放军总医院第二临床部妇产科，北京100091,3 第三军医大学免疫研究所，重庆400038) 摘　要 目的 获得鼠精子蛋白Sp17基因，构建重组表达载体并在大肠杆菌中表达。方法 提取Balb/c小鼠睾丸总RNA，通过PCR扩增Sp17全长序列，克隆至pMD-T质粒载体中，Hind Ⅲ/ XhoⅠ双酶切克隆原核表达载体pET-28a（+）中转化大肠杆菌BL21(DE3)，异丙基-β-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达SDS）、Western blotSp17免疫小鼠后血清特异抗体滴度。结果 获得了Sp17的全长cDNA，成功构建了重组表达载体pET/Sp17，在的诱导下高效表达。结论 小鼠精子蛋白Sp17序列已被克隆至原核表达载体pET-28a（+）中，并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。 小鼠；精子蛋白；克隆；原核表达*and expression of mouse sperm protein Sp17 and its immunological effects ZHANG Qiao-yu1，2，LIANG Zhi-qing1，LI Yu-yan1，LI Jin-tao3，SHI Chan