第三届化学院创新化学研究基金.docVIP

呋喃香豆素类化合物的合成及乙酰胆碱酯酶抑制活性研究 邵嘉亮 沈琼 马林* (中山大学化学与化工学院，广州 51027) 摘要 以间苯二酚为原料，合.成了一系列呋喃香豆素类化合物，并对其进行结构修饰，得到新的芳香亚胺苯并呋喃香豆素类化合物，对这一系列化合物进行生物活性测试，表明大部分化合物有很好的抗乙酰胆碱酯酶活性。 关键词 呋喃香豆素, 芳香亚胺苯并呋喃香豆素衍生物，合成，乙酰胆碱酯酶抑制剂 1 前言 呋喃香豆素类化合物是一种具有很强的生理活性、药理活性及生物活性的天然产物。具有抗凝血、抗肿瘤，抗病毒，抗血管硬化，增强自身免疫能力、抗细胞增生、抗菌、抗艾滋病、抗疲劳及钙拮抗性等功效。天然存在呋喃香豆素有线型和角型两种类型。临床上用于治疗白癞风、银屑病、皮肤癌、乳腺癌，以及一些免疫功能缺失的疾病：艾滋病、风湿病、红斑狼疮、心脏移植中的排斥性反应等。 乙酰胆碱酯酶 (acetylcholinesterase, AChE, EC3 .1 .1 .7. ),主要的生物学功能是在胆碱能神经突触处通过快速水解神经递质乙酰胆碱 (ACh)，而中止神经冲动的传递。阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD, 又称早老性痴呆，presenile dementia），主要病理特征是大脑萎缩，脑 组织内产生Aβ蛋白沉淀物和神经原纤维缠结，导致乙酰胆碱分泌不足。抑制AD病人乙酰胆碱酯酶的活力，延长脑内乙酰胆碱的存在时间，使乙酰胆碱在脑内的含量增加，是当前治疗AD有效的手段之一。 根据AD的病理表现以及乙酰胆碱酯酶的三维结构模型，本文合成了一系列芳香亚胺苯并呋喃香豆素类化合物，并测定了它们对于乙酰胆碱酯酶的抑制活性，发现效果很好。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 熔点用 X－4显微熔点仪测定，温度计未校正；UV用岛津UV-250IPC型紫外光谱仪测定；IR用Bruker EQUINOX55一型仪测定，KBr压片；1HNMR、13CNMR及相关谱用USA Varian公司UNI－TYINOVA500型仪测定，TMS为内标；移液枪是法国GILSON公司产品，Orion Model 720A pH计，Gunt w28 恒温水浴锅。所用试剂均为分析纯，柱层析和薄层层析用硅胶为青岛海 洋化工厂产品。生化试剂乙酰胆碱酯酶(acetyl- cholinesterase,ACh E, EC3 . 1 . 1 . 7. )，硫代乙酰胆碱 (Acetylthiocholine) ，5, 5-二硫代双 (2 -硝基苯甲酸 ) (DTNB) 都是Sigma公司产品。 2.2 芳香亚胺苯并呋喃香豆素类化合物的合成 2.2.1 7-羟基-4-甲基香豆素（1） 在250mL三颈瓶中加入浓硫酸100mL（比重1.84），用冰盐浴使温度降至10℃以下，在搅拌下通过滴液漏斗慢慢加入11g（0.1mol）间苯二酚和0.12mol乙酰乙酸乙酯组成的混合液，滴加速度以使反应温度维持在10℃以下为准。滴加完毕后在室温下放置4个小时，在搅拌下加入到200g碎冰和300mL水组成的冰水混合物中，抽滤，收集沉淀，并用冰水洗三次。得到的沉淀物溶于0.5%NaOH溶液中（约500mL），滤去不溶物，滤液用浓H2SO4调至pH=3，抽滤并用冰水洗。最后用80%乙醇重结晶，得到化合物(1)，产率为80%。 2.2.2 4，7-（2’-氧化环己氧基）香豆素（2） 在250mL三颈瓶中加入650mL干丙酮、0.02mol化合物（1）、50g无水K2CO3和0.05gKI。搅拌下慢慢升温，当丙酮回流时开始滴加含0.03mol 2-氯环己酮的丙酮溶液20mL，大约需要2个小时滴完。再反应10个小时后加入10g无水K2CO3，用TLC监控反应。当化合物（1）已经反应完全时停止反应，整个反应过程需时18个小时左右。冷却，过滤，弃去滤渣，蒸干滤液，用甲醇重结晶，得到化合物（2），产率为80％。 2.2.3 6，7，8，9- 4H-4-甲基-2H-苯并[3,2-g]-1-苯并吡喃-2-酮（3） 在1000mL三颈瓶中加入32gNaOH（配成0.8mol/L溶液），搅拌，回流。在氮气保护下，加入0.01mol的化合物（2）。搅拌，回流，1.5个小时后停止反应，冷却，将整个反应装置放在暗处，用2?mol/L的盐酸调节溶液的PH值，直到溶液有沉淀产生，抽滤，滤渣用甲醇重结晶，得到化合物（3），产率为95%。 2.2.4 4-甲基-2H-苯并呋喃[3,2-g]-1-苯并吡喃-2-酮（4） 在500mL三颈瓶中加入300mL甲苯和1g化合物（3），搅拌，回流，直到化合物（3）完全溶解。在氮气保护下加入3gDDQ，反应10分钟后加入Pd/C，搅拌