009选择HIV抗体的筛选方法.ppt

第 五 章选择HIV抗体的筛选方法 一、敏感度和特异性 敏感度：是该方法能够检测出最弱阳性标本的能力，与实验结果中被感染的个体有关。 特异性：是该方法能够检测出真阴性标本的能力，与实验结果中没有被感染的个体有关。 计算敏感度和特异性的方法，用以下两个简单的公式： 敏感度= ×100% 特异性= ×100% 例题： 某血站用10个室间质评品测定某公司抗HIV试剂的灵敏度、特异性，其结果如下： （说明：厂家说明书cutoff值计算公式为：阴性均值+0.12，本试验的CO值=0.08+0.12=0.20 标本OD≥0.20者为阳性，反之为阴性）根据上述结果计算其灵敏度和特异性（P49） 列出四格表 真结果 合计 真结果 合计 + - + - 灵敏度= ×100% = ×100%=80% 特异性= ×100% = ×100%=60% 两者的关系：方法的特异性和敏感度一般来说成反比关系，即当敏感度上升时，特异性下降，而特异性上升时，敏感度下降。 两者的意义： 在HIV 筛检中一种方法的敏感度与安全输血紧密相关，重要性显而易见。 一种方法特异性与其操作步骤及包被的抗体或抗原的来源有关。例如，用纯化抗原（如合成肽）就可降低非特异性反应。因为几乎没有其它肽分子的存在。 强调：无论报导某种筛检方法的特异性和敏感度如何的好，它的最终结果还是靠操作者的熟练操作。 二、选择试验的种类时要考虑的因素 1、第一步是在本地或本国找到一种有售的、适宜的检测试剂。如HIV-1+2型。 2、灵敏度、特异性。 3、献血员的数量。 4、试剂价格、供应情况。 5、所需的仪器、设备、水、电等。 三、影响筛检工作的因素 1、人员培训，内容包括 1）培训实验操作 谁提供培训及培训工作的负责人 培训类别 培训时间 受训者的技能考试情况 培训是否定期进行 2）培训正确记录结果 2、设备和试剂的特殊要求，如加样枪及其吸头、专用微孔板、酶标仪、洗板机等。 3、试剂盒的供应： 国内主要是计算好试剂盒的用量和库存数量，通常应考虑以下因素： ※在特定的时间里将要检测的标本数量 ※重做初次反应性的标本(你可能觉得有必要再重复一次)的量 ※你用的任何室内质控品或室间质控品 ※试验失败的次数 4、试剂贮藏的条件：一般为2-8℃，这就需要考虑冰箱及电力供应等情况 5、适宜待检样本----样品的类型和质量 ※类型：血清、血浆、全血 ※质量：用血清时要等血完全凝结，防溶血，防脂血，要新鲜、无细菌生长 6、质控品的供应 ※定义：室内质控品、室间质评物 ※用途：监测精密度和准确度。每个进行HIV抗体检测筛选的实验室都必须开展室内质控和参加室间质评工作，这就需要质控品、质评品。 7、HIV抗体检测的时间限制：在急救时血源供应不上时的对策。 8、筛选检测的费用 ※总结 1、方法的敏感度是对被感染的个体测出反应性结果的可能性，而特异性则是对未被感染的个体测出无反应的可能性。 2、选用最适宜你特定环境下用的方法非常重要。 3、对所有的员工必须进行正确操作实验的培训。 4、试剂必须贮存在适宜的条件下，以保证其被正确使用和结果的可靠。 5、应用新鲜的、完全凝结的并正确贮存的标本。 6、如果得不到室间质评品，可以用各个批号不同浓度室内质控品代替。 7、无论时间多么有限，必须在输血前进行HIV抗体的筛选试验，当时间紧迫时，最适宜的方法是特异性快速法。 8、筛选方法的开支由许多因素组成，并不只是指检测试验的开支。 * * 真阳性数 真阳性数+假阴性数 真阴性数