2009分子生物学基础实验.pptVIP

分子生物学基础实验 2010.06 人员安排：博一：和君 研二：胡玥，李芳，臧富玉 研一：李红梅，刘国乾 时间安排 8：00-9：00 基本原理讲解 9：00-11：30 RNA抽提 11：30-12：00 RT 12：00-13：00 反转一小时 13：00-15：45 PCR 13：00-15：45 质粒的抽提 16：00-17：00 跑胶，鉴定 17：00-18：00 晚饭 18：00-19：30 胶回收，连接 19：30-21：00 转化，挑菌 实验目的 了解基因工程的基本实验操作内容及原理 掌握RNA抽提的原理及操作、RT-PCR方法及原理，了解PCR操作、掌握电泳方法及产物的回收方法。 学习扩增产物的连接、转化 了解感受态细胞的制备 学习质粒的提取方法 实验内容 RNA的抽提 RT PCR 电泳 连接 转化 质粒的制备与提取 酶切鉴定 实验材料 1.1 试剂：AMV Buffer 、dNTPs、反转录引物、上下游引物、ddH2O、 AMV Rtase、pMD18-T、Taq、LB培养基、氨卞青霉素（液体）、溶液I、溶液II、溶液III、75%乙醇等。 1.2 仪器设备：PCR热循环仪、恒温水浴、恒温培养箱、琼脂糖凝胶电泳系统、台式高速冷冻离心