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第二章 色谱法的基本参数及理论 一、色谱分离与保留作用 色谱的保留作用：在色谱系统中，当样品混合物被流动相带入柱内后，便在固定相与流动相之间不断地进行分配平衡。不同的化合物由于他们之间理化性质的差异，在两相中存在量的比值也各不相同。固定相中存在量多的化合物，冲出柱子所需消耗流动相的量就多，较慢地被从色谱柱中被洗脱出来。流动相中存在的比例大的化合物，冲洗出柱子所需消耗流动相的量就少，较快地被从色谱柱中被洗脱出来。这种现象就称为色谱的保留作用。 图 2-1 色谱分离示意图 样品组分在两相间分配平衡时，其在两相中存在量的比值称为容量因子(capacity factor) k’，又称分配比（partion ratio）或分配容量。 k’ = 式中，Ms：组分在固定相中的量，MM：组分在流动相中的量。在固定相中的量为零的化合物，其k’=0，这些组分被称为在该色谱条件下的非保留物质。容量因子（分配比）可通过实验计算：k’ = 。即k’为组分在固定相中消耗的时间与其在流动相中消耗的时间之比。 样品组分在两相中分配平衡时，其在固定相和流动相中的浓度比称为分配系数（partion factor），分配系数以K表示。其公式如下： K = = k’· 式中，Ms/Vs为样品组分在固定相中的浓度，Mm/Vm为样品组分在流动相中的浓度。 分配系数大的组分保留时间长（色谱的保留作用强