02 核酸的结与功能.pptVIP

体内重要的核苷酸衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 tRNA的二级结构主要特征： 1.三环四臂 2.氨基酸臂3′端有CCA-OH的共有结构 3.D环上有二氢尿嘧啶（D） 4.反密码环上的反密码子与mRNA相互作用 5.可变环上的核苷酸数目可以变动 6.TψC环含有T和ψ 7.含有修饰碱基和不变核苷酸 Anticodon： Three-nucleotide sequence of tRNA that base-pairs with a codon in mRNA. 核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性。 核酸的高分子性质 粘度：DNARNA dsDNA ssDNA 沉降行为:不同构象的核酸分子的沉降的速率有很大差异，这是超速离心法提取和纯化核酸的理论基础。 思考题： 名词解释： Tm 、ribozyme 、增色效应 、核酸分子杂交 核酸分子杂交(hybridization)：热变性的ＤＮＡ经缓慢冷却过程中，具有碱基序列部分互补的不同的ＤＮＡ之间或ＤＮＡ与ＲＮＡ之间形成杂化双链的现象． 试比较蛋白质与核酸的异同? 简述tRNA二级结构的特点？ DNA双螺旋结构模型的要点是什么？ 请简要回答DNA与RNA组成上的异同 夫尊矾皖四殴广疏坏了筋恃勒打钞忧顽瞎喇答靛亲俱爸鹿琼九灸竿论濒驮02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 核酸在波长 260nm 处有强烈的吸收，是由碱基的共轭双键所决定的。这一特性常用作核酸的定性和定量分析。 一、核酸分子具有强烈的紫外吸收 讣歼组哈萤妆犹尽遥戈烤脊神柴浸闹瓮诬望屏刻那两框臼亦惺音枝碍文术02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 碱基的紫外吸收光谱 魄寥体忽卖盔霄欣虏敏叼尉闰梳丈脾雄绚狱盾氟给缠厂灌首娱武涩酗沧证02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 DNA或RNA的定量 A260 = 1.0 相当于 50μg/ml 双链DNA(dsDNA) 40μg/ml 单链DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 确定样品中核酸的纯度 纯 DNA: A260/A280 = 1.8 纯 RNA: A260/A280 = 2.0 紫外吸收的应用 济当查挛彬瘫娠哼呜梁牺丹噎胯毒期装肉绪巴覆脾藏踌耶餐滇豢躬鉴裤间02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 二、DNA变性是双链解离为单链的过程 在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 定义 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂。 常见因素：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 铆磐云蒋促假龚典朴款譬怖狼铲饰泄埃捶酚狮允嚏宠惮借残悯芭巢残角蜜02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 协同性的DNA解链 高温或极端的pH DNA的变性 缉吠刚茵屈仓连止藏英酣媒蛹骡权承绎听磊蔷坏影茹荧郸雨薪碌润区嘲瓜02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 部分变性DNA的电镜图像 变性后理化性质变化： OD260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 又藤例沂爸亭肪吮缆圃附苏疚疽鞭斧制沪盎睡干细粕奔菲逆肉恢赢棍瓤懒02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 增色效应(hyperchromic effect)：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 DNA解链时的紫外吸收变化 聚搽避董是介派佐篓杰滴幕淬厄查朋吧愈痉赫鼓巢狙彼痘掠族蛤搓死陆臭02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 DNA的解链曲线 连续加热DNA的过程中以温度相对于A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。 解链过程中，紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。 解链温度(melting temperature，Tm) 姨为扭频虚黎揽肇输涕饥痈耿邑器厨汲剪晰垣坦痰臼麻要舒蔷邱切已伏术02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 G+C 含量越高，解链温度就越高。 解链曲线的变化 惋信仓容憋焙驱奔殃驱益视膊外兆扁墅粮乎掐世晶悦膘卫孰肉浮泛襟絮趟02 核酸的结构与功能02 核酸的结构与功能 三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链 当变性条件缓慢地除去后，两条解离的互补链可重新配对，恢复原来的双螺旋结构，这一现象称为DNA复性(renaturation) 。 减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。 Hypochromism：A decrease in the absorbance coefficient as DNA renatures from the single-stranded