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                药用植物学实验指导
实验一 显微镜使用与植物细胞观察
一、实验目的:
1、学会正确使用与保养光学显微镜。
2、学会临时装片法。
3、学会绘制植物细胞图的基本技术,能绘出植物细胞图,并注明各部分名称。
4、了解显微镜的类型、构造及简要的工作原理。
5、通过实验理解植物细胞的概念、结构及作用。
二、仪器用品及实验材料:
1. 仪器用品:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、0.03%中性红、1mol/L硝酸钾溶液4mol/L(24%)尿素溶液稀甘油、稀碘液、、吸水纸。
光学显微镜是由光学部分和机械部分两大部分构成。
1、光学部分:主要包括物镜、目镜、反光镜和聚光镜四个部件。
2、机械部分:主要由精巧的金属零件组成,作用是支持光学部分,使其充分发挥效能。主要有镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器和调焦装置等六部分。
(三)显微镜的使用
每台显微镜一般都配有低倍、高倍、油镜三个物镜头,在观察物体时,要先在低倍镜下观察,因低倍镜的视野范围大,容易找到观察物,然后转换高倍镜观察,若需要再放大时,再到油镜下观察。
低倍镜的使用 取镜-对光-放置载玻片-调焦
高倍镜的使用 由低倍—高倍—低倍
(四)显微镜的使用、保护的注意事项
显微镜应放在干燥的地方,避免强烈的日光照射。
拿取显微镜时,应右手握镜臂,左手托住底座,使镜身直立,切勿左右摇晃,以免碰伤或目镜滑出。
保持显微镜的清洁,用擦镜纸擦拭镜头,不可用手或毛布擦物镜和目镜;用绸布或纱布擦机械部分。
观察时应由低倍到高倍再到低倍,决不可先用高倍物镜,以免损坏玻片而影响观察。
1.1 将染色后的植物材料放到载玻片上,盖好盖玻片,在盖玻片的一侧滴加无离子水(或pH略高于7.0的自来水),另一侧放吸水纸吸干,以洗净撕片外粘附的中性红溶液,然后在显微镜下观察,可以看出液泡染成樱桃红色;原生质层(细胞质和细胞)则无色透明紧贴细胞壁(在细胞的角隅上可以看见)。
1.2 在第1项观察后,接着从盖玻片的一边滴2滴1mol/L硝酸钾溶液, 在盖玻片的另一边用吸水纸吸盖玻片下的水,将硝酸钾溶液引入盖玻片下浸渍植物材料,并立即镜检,可以看到细胞很快发生凸形质壁分离。
1.3 在第2项观察后,接着在盖玻片的一边加入2~3滴无离子水,在另一边用吸水纸吸去硝酸钾溶液,使质壁分离剂(即高渗的硝酸钾溶液)被基本上洗吸掉。立即镜检可以看到带有液泡的原生质体重新吸水膨大,最后充满整个细胞腔,即质壁分离复原(复原缓慢进行时,细胞仍可正常存活;如果进行很快,则会因原生质机械破坏而死亡。(2)另撕取内表皮少许,平展于载玻片的水滴上,加一滴水,加盖玻片制成临时装片。低倍镜下观察细胞结构。细胞壁较透明,细胞质颜色均匀,细胞核扁球形,仔细观察可见其内13个发亮的核仁。再在高倍镜下仔细观察从一侧滴加稀碘液,细胞质被染成浅黄色,细胞核被染成深黄色。、实验报告:绘出洋葱内表皮细胞结构图,标明细胞壁、液泡、细胞质和细胞核。
 
1、实验三 植物细胞后含物的鉴定
一、实验目的:
1、识别细胞主要后含物的种类及鉴别方法。
2、学习徒手切片和组织粉末装片法。
3、通过实验理解后含物的概念、种类及在鉴定药材中的意义。4、绘出不同类型淀粉粒、结晶的形态图。
III试液、水合氯醛、稀甘油。
2、实验材料:马铃薯块茎、小茴香粉末、杏仁(或蓖麻)、党参粉末、无花果叶、半夏粉末、大黄粉末、黄柏粉末。
三、实验内容:
(一)贮藏物:与淀粉鉴别
1、淀粉粒观察:刮取马铃薯块茎组织少许,加斯氏液制作临时装片,镜下观察淀粉粒类型。加稀碘液,观察淀粉粒颜色变化。
2、糊粉粒观察:观察小茴香粉末(需透化),制临时装片。观察胚乳细胞的糊粉粒。加稀碘液,观察糊粉粒颜色变化(暗黄色)。注:还有无色的、不被染色的球晶体,它不是蛋白质分子,而是无机磷酸化合物与钙、镁结合的盐类。
3、油滴观察:杏仁(或蓖麻)徒手切片(浸泡后切面在载玻片上抹过),制临时装片,加苏丹III试液,观察油滴颜色变化(橙红色)。
       4、菊糖观察:党参粉末,首先浸于乙醇溶液1周,进行软化,然后加透化剂(水合氯醛)加热透化,加热时须续加透化剂,至待观察样品透化清晰为止。观察菊糖形态(类圆形或扇形)。
图3—10马铃薯块茎淀粉粒A.单粒; B.C.D 复粒; E.半复粒
 
图3—11 蓖麻种子的胚乳细胞示糊粉粒1.球晶体;2.拟晶体;3.无定形胶层;4.糊粉粒;5.细胞核
(二)晶体
1、取大黄粉末制临时装片,观察簇晶形态。
2、取半夏粉末制临时装片,观察针晶形态。
3、取黄柏粉末制临时装片,观察方晶形态。
4、撕取无花果叶表皮,制临时装片,观察表皮细胞中的钟乳体。
四、作业与思考:
植物细胞后含物(贮藏物)主要有哪些种类?产生和储藏的部位如何?如何鉴别?
五、实验报告:绘出不同类型淀粉粒、结晶的形
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