第8章核酸分子杂交.pptVIP

第八章??? 核酸分子杂交技术 湖北医药学院 郭兴荣 内容提要： 目的与要求： 第一节????核酸杂交基本原理与分类 基 本 概 念 单链的核酸分子在合适的条件下，与具有碱基互补序列的异源核酸形成双链杂交体的过程称核酸分子杂交（molecular hybridization） 利用核酸分子杂交检测靶序列的一类技术称核酸分子杂交技术 探针（probe）：用放射性核素或非放射性物质标记的一段单链或双链核苷酸，可于互补序列的待测核酸进行杂交，以探测它们的同源程度 二、杂交的基本分类 （一）液相杂交 （二）固相杂交 （三）原位杂交 （四）基因芯片技术 二、杂交的基本分类 1.菌落杂交 4.点杂交和狭缝杂交 第二节 探针的设计与标记 （二）标记方法 　1.探针标记物的选择 1）放射性标记 　 （二）标记方法 　1.探针标记物的选择 2）非放射性标记 　 （二）常用的非放射性标记 优点：无环境污染，可较长时间贮存 2.探针标记方法的选择 随机引物标记 DNA缺口平移标记 全程RNA探针标记 化学法全程标记 3′末端标记 5′末端标记 一、设计原理 一、设计原理 第三节 分子杂交 一、核酸分子与固相介质