基因工程原理-第二章DNA重组解剖.ppt

基因工程原理 Principle of Gene Engineering 第二章 DNA重组 第一部分 DNA的组成和结构 1.1 DNA的组成 1.2 DNA的空间结构 1.3 DNA复制 复制子 复制子的数量 1.4 DNA转录启动子和转录区的结构 1.5 DNA转录终止子（transcription terminator） 1.6天然DNA的来源和用途 染色体DNA：分离目的基因的主要材料，1000～106kb 病毒DNA：用于构建基因克隆载体,T4、λ… 质粒DNA：用于构建基因克隆载体 线粒体DNA：呼吸作用的基因 叶绿体DNA：光合作用的基因 （1）大肠杆菌源质粒DNA的提取 （2）λ噬菌体DNA的提取 （3）氯化铯法制备植物基因组DNA 1.8 DNA的纯化 第二部分 基因工程工具酶 基因工程工具酶 限制性核酸内切酶 DNA连接酶和激酶 DNA聚合酶和RNA聚合酶 DNA和RNA修饰酶。 一、序列特异的DNA限制性内切核酸酶 (Restriction endonuclease, RE） ——指能够识别双链DNA分子中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的核酸内切酶。 来源：原核生物 种类：500多种 作用：把外源DNA切割成片段。 RE的功能: 防御外源DNA感染,利于遗传的稳定性 RE抑制了细菌种属间的交