1.2 基因工程的基本操作程序剖析.ppt

1.将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法 （双子叶植物和裸子植物） 农杆菌：在土壤中生活的原核微生物，能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染力。 原因：当双子叶植物和裸子植物受到损伤后，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌细胞移向这些细胞，这时，农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上。 将目的基因导入植物细胞的方法 农杆菌转化法 基因枪法（单子叶植物） 花粉管通道法 （我国独创，转基因抗虫棉由此而得） 2.将目的基因导入动物细胞 显微注射法 用口径为1μm的DNA注射器，将大量的目的基因片段注入到受精卵的核内，然后把经过注射的受精卵移植到另一只雌性动物的子宫内，使受精卵发育为转基因动物。 什么叫显微注射技术？ 显微注射技术 3.将目的基因导入微生物细胞 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是: 首先用Ca2+ 处理细胞,以增大细菌细胞壁的通透性,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞. 然后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程. 原核生物特点： 繁殖速度快、容易培养，多为单细胞，遗传物质相对较少。 常用方法：感受态细胞法 检