生化試验试题.docVIP

DNA电泳结果模糊或出现不规则迁移可能是由于什么原因引起？ 试题答案 DNA部分降解、PCR扩增产生了与目标产物大小接近的非特异产物、电泳缓冲液使用过久、电泳过程中断电、电泳结束后未及时观察拍照等会导致DNA电泳结果模糊； 琼脂糖凝胶质地不均匀、琼脂糖凝胶中有气泡、电泳电压过高等会导致DNA电泳结果出现不规则迁移。 哪些因素可以导致DNA条带弱、无条带或条带缺失？ 试题答案 DNA浓度低、PCR扩增倍数不够、点样量少、EB荧光染料加入不足等会导致DNA条带弱； ? ? DNA提取失败、DNA保存不当完全降解、PCR扩增失败、点样孔穿底、电泳过久DNA完全泳出凝胶等会导致无条带； 部分DNA泳出凝胶、酶切过久产生星号酶切等会使条带缺失。 以下关于DNA琼脂糖凝胶电泳实验的描述，其中错误的是（? ） A DNA带负电荷，向阳极泳动 B EB带正电荷，向阴极泳动 C 用白光灯观察结果 D EB可致癌，操作时必须戴手套 试题内容 试题答案 AP：化学聚合的催化引发剂； TEMED：化学聚合的催化加速剂； VB2：光聚合的催化剂； 蔗糖：排管时封底，增加浓缩胶的机械强度，增加酶液的比重； H2O2：过氧化氢同工酶作用的底物，在酶的作用下生成H2O和O2，O2能氧化染色液中的联苯胺； 联苯胺：氧化后呈褐色，能指示出同工酶在凝胶中的位置； 溴酚蓝：示踪剂。 试题类型 知识点 章节 课次 30. 维生素C的定量测定实验有什么优、缺点？ 优点：简便易行 缺点： （1）提取物中的VC有还原型VC、脱氢VC和结合型VC不同形式，后二者不能使氧化型2, 6-二氯酚靛酚（2, 6-D）还原脱色，而本实验只是测定还原型VC； （2）提取物中还含有其它还原性的物质，也能使氧化型2, 6-D还原脱色； （3）提取物中的色素会干扰终点判定。 试题答案 ? 因为本实验利用了反滴定法，样品测定组和空白对照组体系中的H2O2量相等且远远过量，但由于空白对照组中的酶先被强酸作用而失活，H2O2没被分解；而在测定组中，样品中的过氧化氢酶分解了部分H2O2，H2O2可将KI氧化为I2，生成的I2越多，溶液的酒红色就越深。同时，若样品中的过氧化氢酶活力越大，分解的H2O2越多，剩余的H2O2越少，可产生的I2就越少，两组之间色差就越大。 制备浓缩胶的光聚合的原理和特点是什么？ 光聚合是催化剂核黄黄素（VB2）经光解形成无色基，无色基在被氧氧化形成自由基，从而引发丙烯酰胺和甲叉双丙稀酰胺聚合反应。光聚合通常需要迹量氧存在，但过量氧会阻碍聚合。 光聚合特点是：（1）凝胶的孔径较大；（2）但孔径不太稳定，且随着时间推移会渐渐变小。 聚丙烯凝胶电泳实验中，制备分离胶的化学聚合的原理和特点是什么？ 试题答案 化学聚合多采用催化剂过硫酸铵（AP）和四甲基乙二胺（TEMED）分别作为催化引发剂与加速剂，在TEMED作用下AP形成氧的自由基，从而引发丙烯酰胺和甲叉双丙稀酰胺聚合反应。分子氧和一些金属离子会阻碍聚合，低温会使聚合速度变慢。 化学聚合特点是：（1）凝胶的孔径较小；（2）凝聚制备的重复性好。 三种物理效应：浓缩效应、分子筛效应、电荷效应； 四个不连续梯度：缓冲液离子成分的不连续性、pH 以下对考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验的描述中，错误的是（? ） A 在595nm波长下测定OD值 B 不存在无法避免的系统误差 C 需要让G-250与蛋白质反应2min D 需要在1h内完成OD值的测定 试题内容 A Vc B 联苯胺 C 双氧水 D 醋酸 A Tris-Cl(pH6.7) B Tris-Cl(pH8.9) C Tris-Cl(pH8.3) D Tris-Gly(pH8.3) 以下对光聚合方式所制备的浓缩胶的描述中，错误的是（? ） A 孔径大 B 不稳定 C 重复性差 D 重复性好 以下试剂均在实验课程中出现过，其中没有毒性的是（ ） A 过硫酸铵 B 淀粉 C 丙烯酰胺 D 联苯胺 2, 6-二氯酚靛酚在碱性环境下呈现红色。 正确?? 错误 正确?? 错误 正确?? 错误 正确?? 错误 正确?? 错误 Na2S2O3应使用碱式滴定管盛装。 正确?? 错误 2, 6-二氯酚靛酚在碱性环境下呈现蓝色。 正确?? 错误 正确?? 错误 正确?? 错误 正确?? 错误 A 碘量法 B 纸层析法 C 分光光度法 D G-250法 A 化学聚合 B