植物总DN提取及琼脂糖凝胶电泳检测.pptVIP

植物总DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳检测 1.结合原理，简述CTAB法分离提取植物总DNA的基本过程。 2.为了获得高质量的植物总DNA，在分离提取过程中应注意那些问题？ What?! How?! 思考 植物基因组DNA的提取 琼脂糖凝胶电泳检测 脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA) 与蛋白质结合在一起以核蛋白（DNP）的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。 植物总DNA包括细胞核DNA和细胞核外DNA,前者存在于细胞核内，后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内，例如线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。 背景知识 核酸的存在形式 DNA为白色类似石棉样的纤维状物，RNA的纯品呈白色粉末或结晶。 DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水。 在酸性溶液中，核酸易水解，中性或弱碱性溶液中较稳定。 核酸的理化性质 细胞破碎 抽提去蛋白质 沉淀核酸 基本过程 ①机械方法： 超声波处理法、研磨法、匀浆法； ②化学试剂法：用SDS处理细胞； ③酶解法： 加入溶菌酶，破坏细胞壁。 细胞破碎 SDS法 SDS是有效的阴离子去垢剂, 细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合, SDS能够破坏这种价键。 C