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- 2016-12-08 发布于贵州
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植物总DN的提取及琼脂糖凝胶电泳检测
植物总DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳检测 制作人:刘红梅 紫外仪上观察电泳带及其位置。 绘制核酸电泳示意图。 作业 1.结合原理,简述CTAB法分离提取植物总DNA的基本过程。 2.为了获得高质量的植物总DNA,在分离提取过程中应注意那些问题? What?! How?! 思考 植物基因组 DNA的提取 琼脂糖凝胶电泳检测 脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA) 与蛋白质结合在一起以核蛋白(DNP)的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。 植物总DNA包括细胞核DNA和细胞核外DNA,前者存在于细胞核内,后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内,例如线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。 背景知识 核酸的存在形式 DNA为白色类似石棉样的纤维状物, RNA的纯品呈白色粉末或结晶。核酸和核苷酸大都呈酸味。 DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离酸易溶于水。 在酸性溶液中,核酸易水解,中性或弱碱性溶液中较稳定。 核酸的理化性质 细胞破碎 抽提去蛋白质 沉淀核酸 基本过程 ①机械方法: 超声波处理法、研磨法、匀浆法; ②化学试剂法:用SDS处理细胞; ③酶解法: 加入溶菌酶或蜗牛酶,破坏细胞壁。 细胞破碎
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