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421动物细胞培养和核移植技术上课(阅读)

克隆羊“多莉” 思考与讨论: (1)理论基础? (2)受体细胞是什么?原因?MⅡ的含义? (3)为什么是直接将供体细胞注入无核的卵母细胞?而不是将供体细胞的细胞核注入无核的卵母细胞? (4)繁殖方式?若供体为雄性白毛羊,受体为雌性黑毛羊,那么克隆羊为?此方法产生的克隆动物是对供体动物的100%复制吗?为什么?幻灯片 18 植物体细胞杂交过程示意图 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同? 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。 50代以后 失去接触抑制 接触抑制 动物细胞生长特性 部分细胞突变,获得不死性,向癌细胞方向发展,糖蛋白减少。 1、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么? 保存10代以内的细胞,因为10-50代部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展 思考题 2、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 4.动物细胞培养技术的应用 1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等; 3、用于检测有毒物质及毒性; 2、动物基因工程离不开动物细胞的培养; 4、培养正常或各种病变的细胞,用于生理、病理、 药理等方面的研究。 阅读P46-47 资料: 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 相同点 均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件 均为有丝分裂 相同点 生产生物制品、检测有毒物质、研究药理病理、移植治疗等 快速繁殖、脱毒植株、人工种子、生产细胞产物、转基因植物培育等 培养目的 细胞 新的植株或组织 培养结果 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体 固体 培养基性质 细胞增殖 细胞的全能性 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 克隆就是无性繁殖,具体地说,是指 一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上: b.细胞水平上: c.个体水平上: 1. 什么是克隆? 一般指DNA克隆。 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。 指基因型完全相同的两个或一个群体。 2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得?为什么? 目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前,用动物体细胞克隆的动物,实际上是通过核移植来实现的。 动物体细胞核移植技术 1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 ( MⅡ卵母细胞) 减数第二次分裂中期 2.结合P48图2-21,叙述克隆高产奶牛的培育过程。 将供体细胞注入去核卵母细胞 核移植 胚胎移植 供体细胞培养 1 4 3 2 △ (三)体细胞核移植技术的应用前景 阅读P49-50 1、畜牧业方面: 2、医药卫生方面: 可以加速家畜遗传改良的进程,促进优良畜群繁育。 保护濒危物种,增加其存活数量 生产医用蛋白质 组织器官的移植 3、其他领域 了解胚胎发育及衰老过程 更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病 (四)体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率低 2、克隆动物存在健康问题 3、对克隆动物食品的安全性存在争议 2002年12月30日, 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草

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