血清丙氨酸基转移酶活力的测定.pptVIP

血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定（改良赖氏法） 主讲人：杨宇光 小组成员：刘婷婷 刘杰 陈琪 杨宇光 实验目的 了解血清丙氨酸氨基转移酶活力单位的定义 掌握血清丙氨酸氨基转移酶活力单位的测定方法和临床意义 实验原理 丙酮酸-2,4-二硝基苯腙在碱性环境中呈现红棕色，颜色的深浅与丙酮酸含量成正比，与标准丙酮酸的显色进行比较，即可测定丙酮酸的含量。 α-酮戊二酸也能与2,4-二硝基苯腙结合成相应的苯腙，在碱性条件下显色。两种苯腙的吸收光谱有差异，在520nm比色时，丙酮酸-2,4-二硝基苯腙的吸光度值远较α-酮戊二酸苯腙高。反应30min后，α-酮戊二酸量减少而丙酮酸量增高，在一定范围内，520nm处吸光度增加的程度与反应体系中丙酮酸与α-酮戊二酸的物质的量之比呈线性关系。 实验操作 （1）标准曲线的绘制：取试管5支，按表操作。 实验操作 将上述各管混匀，室温放置10min后以蒸馏水调零，用520nm波长比色，读取各管吸光度，然后以各管吸光度减去0号管的吸光度之差（An-Ao）为纵坐标，各管相应的转氨酶活力单位为横坐标，绘制标准曲线 取试管2只（标明测定管和对照管），将测定前将底物液在37℃水浴中预温5min，再按下表操作 血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定 混匀，室温放置10min后，以蒸馏水调零，在520nm波长处比色，读取吸光度，用T管得吸光度减去C的吸光度，查标准曲线，即得到待测血清