chapter+19+两水相萃取教程范本.pptVIP

7.4.3.2 盐的浓度 当pH6.9时，在PGE4000 8%及DX500的两相系统加入NaCl时，对蛋白质的分配产生很大的影响。 续 返回 结论： 加入适当的盐类，会大大促进带相反电荷的两种蛋白质的分离。 当盐的浓度继续增加时，影响逐渐减弱，分配系数基本上无变化。 19.4.4 pH值 ①pH会影响蛋白质中可以离解基团的离解度，因而改变蛋白质所带电荷和分配系数。 ②pH也影响磷酸盐的离解程度。 pH影响H2PO4-和HPO42-之间的比例，使U2-U1发生变化，从而影响K。 讨论：如何设计利用两水相技术测定两性物质的pI？ 在不同的盐系统中，生物大分子在pH=pI处，其K=K0相同。 19.4.5 温度 T影响相图，特别在临界点附近，尤为显著。因而影响K。 一般常温操作 ①节约冷冻费用。 ②室温下，μ较低，容易相分离。 ③成相聚合物对蛋白质有稳定作用。 19.4.6 荷电PEG作为成相聚合物 可以增大两相间的电位差。利用荷电PEG能产生较大的相间电位，能使分配系数增加。 全醪液分离技术 采用双水相技术就可以避免乳化 ,直接从醪液中提取。 细胞、细胞碎片和培养基中的不溶物对分配行为没有显著的影响 ,所以不同批次的发酵液可以取得几乎相同的结果。而且细胞和产物分离在两相 ,避免了胞内的降