DNA序列测定重点解析.ppt

DNA序列测定 讲课内容： 一、Sanger双脱氧核苷酸链末端终止 法原理 二、化学裂解法原理 三、长链DNA序列测定的基本策略 四、DNA的序列分析的自动化 五、310 型DNA测序仪测定DNA序列的 基本步骤 DNA序列测定，是指DNA一级结构的测定，即DNA分子中核苷酸的排列顺序的测定。是现代分子生物学中一项重要技术。 DNA测序技术是在高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的基础上建立和发展起来的。 该凝胶含6%~8%丙烯酰胺，具有分离DNA片段的分子筛效应,能分离仅有一个碱基差别,而长度达300~500个碱基的寡核苷酸片段。 含有高浓度尿素，具有破坏氢键及防止氢键形成的作用，以确保变性测序的DNA单链彼此不相联接，也不因分子内形成氢键而折叠 待测DNA片段 TGGAACCTC生成系列相差 TGGAACCT一个碱基的DNA TGGAACC片段 TGGAAC TGGAA TGGA TGG TG T -