蛋白质工程的崛起(讲课)详解.ppt

蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 1、蛋白质工程崛起的缘由 * * 蛋白质工程的崛起 胰岛素改造 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体，延缓胰岛素从注射部位进入血液，从而延缓了其降血糖作用，这是胰岛素B23-B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程技术改变这些残基，则可降低其聚合作用，使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。这种制剂的形成正是利用了蛋白质工程技术。 一、蛋白质工程崛起的缘由 1、基因工程的应用 （1）基因工程的实质： 将一种生物的基因转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状。 在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 （2）基因工程的不足： 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 2、天然蛋白质的不足 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的蛋白质。 满足人类生产和生活的需要 例如： 改造 干扰素（半胱氨酸） 体外很难保存 干扰素（丝氨酸） 体外可以保存半年 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺） 天冬氨酸激酶 （异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸） 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 改造 改造 二、蛋白质工程的基本原理 根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。 1、目标： 思考：对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？ 应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造，主要原因如下： （1）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。 （2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。 二、蛋白质工程的基本原理 根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。 1、目标： 2、原理： 改造基因（基因修饰或基因合成） 逆转录 转录 DNA RNA 翻译 蛋白质 复制 复制 天然蛋白质的合成遵循中心法则 转录 DNA 复制 转录 DNA 复制 转录 DNA RNA 翻译 肽链 折叠等 具有空间结构的蛋白质 表达生物特有的功能或性状 天然蛋白质的合成过程 遵循中心法则，并需经过高级空间结构的转变 ３. 途径: 预期的蛋白质功能 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因） 蛋白质 三维结构 氨基酸序 列多肽链 基因 DNA 预期功能 DNA合成 分子设计 mRNA 生物功能 转录 翻译 折叠 图1-29蛋白质工程流程图 蛋白质工程是在基因工程的基础上， 延伸出来的第二代基因工程。 五、蛋白质工程的进展和前景 1.进展 胰岛素速效型药品 2.前景 制作电子元件 3.现状 蛋白质工程目前成功的例子不多,原因是对蛋白质的高级结构了解不够。要设计出更加符合人类需求的蛋白质还需经过艰辛的探索。 应用于微电子方面 具有 、耗电少和 的特点 体积小 效率高 讨论：某多肽链的一段氨基酸序列是： …-丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸- 丙氨酸：GCU、GCC、GCA、GCG 色氨酸：UGG 赖氨酸：AAA、AAG 甲硫氨酸：AUG 苯丙氨酸：UUU、UUC 讨论：1、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？ 请把相应的碱基序列写出来。 GCU（或C或A或G）UGGAAA（或G）AUGUUU（或C） mRNA序列 脱氧核苷酸　序列 GCT (或C或A或G) TGGAAA (或G)ATGTTT (或C) CGA (或G或T或C) ACCTTT（或C)TACAAA (或G) 2.确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）？ 确定目的基因的碱基序列后，就可以根据人类的需要改造它，通过人工合成的方法或从基因文库中获取。 2、蛋白质工程的原理： 中心法则的逆推 预期的蛋白质功能出发　　 推测应有的氨基酸序列　　　 设计预期的蛋白质结构 　找到相应的脱氧核苷酸序列 3、蛋白质工程的进展和前景 结 小 堂 课 1 ．关于生物体内存在的天然蛋白质，下列说 法不正确的是（ ） A．是生物在长期进化过程中形成的 B．它