色谱柱故障排除及维护手册讲解.docVIP

目录 1目的 1 2适用范围 2 第一章：气相色谱柱 2 1.气相色谱柱介绍 2 1.1聚硅氧烷 2 1.2聚乙二醇 3 2 气相色谱柱选择 3 2.1相似相溶原理是首要指导方针 3 2.2特殊样品需要用特殊柱子分析 4 2.3必要时需用不同极性的柱子对目标物进行对比分析 4 2.4色谱柱参数对分离的影响 4 3 气体系统 5 3.1气源纯度选择 5 3.2气体过滤器的使用与更换 5 3.3气体管路的材质与检漏 6 4色谱柱的安装 6 5 气相色谱柱的清洗 6 6 气相色谱柱的老化 7 7 气相色谱柱的保存 7 8色谱柱污染 8 9毛细管色谱柱常见问题的解决 8 9.1峰丢失（进样后没有峰出现）的原因： 8 9.2前沿峰的原因： 9 9.3 拖尾峰的原因： 9 9.4只有溶剂峰的原因： 9 9.5宽溶剂峰的原因： 10 9.6 假峰的原因： 10 9.7 过去工作良好的柱出现未分辨峰的原因： 10 9.8 基线不规则或不稳定的原因： 10 9.9 同一根柱保留时间长短不一的原因： 11 1色谱柱的类型 11 常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶、离子交换树脂、凝胶或玻璃微球等填充剂。在化学键合硅胶中以十六烷基硅烷键合硅胶最常用,辛基硅烷键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用。近年来,由于蛋白质等生物大分子物质分离提纯技术的飞速发展,离子交换色谱柱、凝胶色谱柱的应用也越来越广。 11 3.2高效液相色谱柱的选择 12 3.2.1申购前怎样选择填料粒度 12 3.2.2 如何保证良好的柱性能与柱寿命要做到以下几点： 12 4 色谱柱的管理 13 每一根新购进的色谱柱必须造册登记,内容包括:生产公司、品名、型号、规格、购进时间、启用时间、单价、柱内保护溶液等。 13 每启用一根新色谱柱,在色谱柱上贴上标签,注明启用日期。每根柱子每两个月保养一次,特别是对于一些使用频率少的柱子,因为放置时间长,容易干柱,每一次做好保养记录。 13 对于确已失效的柱子,做好停用记录,不能随意丢弃,专门存放,如果现用的柱子的填料需要填补,只要柱子类型相同，可以用存放的柱子的填料修复有缺陷的色谱柱。 13 4.1 建立HPLC色谱柱的技术档案 13 4.2 色谱柱到货验收 13 4.3 新色谱柱注意事项 14 5 影响色谱柱使用寿命的因素 14 5.1 样品的制备与预处理。 14 5.2 选用合适的流动相 14 5.3 正确操作HPLC仪器。 15 6 色谱柱的维护和保养 16 6.1 色谱柱的安装与拆卸 16 6.2 色谱柱的维护与平衡 17 6.3 色谱柱清洗、再生和保养 18 6.3.1 液相色谱柱清洗 18 6.3.2 高效液相色谱柱的再生 19 5.3.3 色谱柱的保存 20 6 色谱柱的故障排除 21 6.1 液相色谱柱常见问题的解决 21 6.2 柱塌陷的处理 24 7 色谱柱使用的注意事项 25 8 保护柱的选择使用 26色谱柱故障排除及维护手册 1目的 在高端仪器检测分析过程中，色谱柱是关键部件之一，在分析中起着至关重要的作用，它是色谱仪器的核心。在分析中峰形的对称性会直接影响到定量的准确性。正确使用、维护色谱柱，不但能保证色谱分离与分析高效、高灵敏和快速进行，提高准确性与重现性，而且对延长色谱柱的寿命、保持长期稳定的工作具有重要的作用，因此，延长色谱柱的寿命无疑对节省投资、降低成本有重大意义。 更便于各实验室对色谱柱的管理、使用、故障及时排除等查阅使用。 2适用范围 本手册适用于具备液相、气相类仪器的实验室。 第一章：气相色谱柱 1.气相色谱柱介绍 通常来说，一根毛细管色谱柱由两部分组成：管身和固定相。管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质：而固定相种类就有许多了。大部分的固定相是液体或胶状的高分子量，具有高热稳定性的聚合物，最常用的是聚硅氧烷（有时误称为硅氧烷）和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石例如氧化铝、分子筛等。色谱柱管熔融二氧化硅即高纯度合成石英（以下通称熔融石英，通常在其表面涂上一层聚酰亚胺做为保护层。涂层后的熔融石英毛细管呈褐色：但是涂层后的毛细管之间的颜色却不尽相同。色谱柱的颜色对于其色谱性能没有什么影响。经过持续的较高温度处理后．聚酰亚胺涂层管的的温度会变得比以前更深：标准的聚酰亚胺涂层管熔融石英管的温度上限为360℃，高温聚酰亚胺涂层管的温度上限为400℃。 1.1聚硅氧烷 聚硅氧烷在其用途的多用性、性质的稳定性上都有优良的表现也是目前最为常用的固定相。标准的聚硅氧烷是由许多单个的硅氧烷重复联接构成：每个硅原子与两个功能基团相连，功能基团的类型和数量决定了固定相总体类型和性质常见的四 种功能基团为甲基、氰丙基、三氟丙基和苯基。最基本的聚硅氧烷是由100%甲基取代的。 1.2聚乙