光化学法对血淋巴细胞的分泌性探索.docVIP

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2016-12-06 发布于天津
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光化学法对血淋巴细胞的分泌性探索.doc

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光化学法对血淋巴细胞的分泌性探索淋巴细胞的分离随机选择采集后内的抗凝全血上海市血液中心提供并制备成浓缩白细胞在无菌条件下用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞用含洗涤次培养基洗涤次弃上清后重悬于完全培养基含胎牛血清置孵箱中培养过夜次日离心收集悬浮细胞加入自体血浆重悬至个细胞对照组和实验组淋巴细胞样本的制备在避光条件下取细胞悬浮液加入终浓度的核黄素混合均匀后注入光照袋中编入实验组另取细胞悬液加入上述核黄素等体积的混匀注入袋编入对照组实验组置于的可见光光源下进行双面照射照射量为对照组不接受光照将各组淋巴细胞离

光化学法对血淋巴细胞的分泌性探索 ; 淋巴细胞的分离随机选择采集后6h内的ACD抗凝全血(200ml,上海市血液中心提供)并制备成浓缩白细胞,在无菌条件下用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,用PBS(含EDTA0.5mmol/L)洗涤2次,1640培养基洗涤1次,弃上清后重悬于1640完全培养基(含10%胎牛血清),置5%CO237℃孵箱中培养过夜;次日离心收集悬浮细胞,加入自体血浆重悬至106个细胞/mL。对照组和实验组淋巴细胞样本的制备在避光条件下,取5ml细胞悬浮液,加入终浓度100μmol/L的核黄素,混合均匀后,注入PVC光照袋中,编入实验组;另取5ml细胞悬液加入上述核黄素等体积的P