* * * * * * 细胞因子的检测方法 左大明 zdaming@ 细胞因子 一类由细胞分泌,具有多种功能的高活性小分子蛋白,参与免疫调节和多种生理病理过程等。 白细胞介素(interleukin, IL) 干扰素(interferon, IFN) 肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF) 集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF) 生长因子(growth factor, GF) 趋化因子(chemokine) 优点:敏感、可靠; 缺点:需长期饲养细胞、检测耗时长、步骤繁杂。 1 不同的CK具有不同的生物学活性,选择CK独特的生物学活性,即可检测。 细胞增殖/抑制实验 细胞病变抑制实验 细胞毒实验 细胞趋化实验 。。。 生物学检测法 细胞因子的检测方法 2 利用抗体对抗原表位的识别,测定的是可溶性细胞因子的抗原性。 ELISA RIA FIA ELISPOT 。。。 免疫学检测法 优点:方便、迅速 缺点:价格昂贵,结果仅代表CK的量而非活性,敏感性较低。 3 利用基因探针,检测特定细胞因子基因表达,即mRNA水平。 斑点杂交 Northern印迹 细胞和组织原位杂交 RT-PCR 。。。 分子生物学检测法 局限性:仅能检测基因表达情况,不能直接提供有关细胞因子的浓度和活性,只用于机制探讨。 待检样品(细胞
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