第三节 动物的克隆 一、动物克隆的技术基础: 动物的细胞和组织培养 思考与回忆: 1、动物细胞全能性特点? 随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄。细胞核仍具有全能性。 2、能否用植物组织培养的方法使动物细胞发育成动物个体? 不能。动物细胞和组织在体外培养的过程中,可以伴随一定的组织分化;但是不管采用什么手段和培养条件,由于细胞的运动、变化,培养物的组织成分也发生结构功能变异,结果长期的培养过程只能使单一类型的细胞保存下来,最终成了简单的细胞培养。 3、动物的细胞和组织培养的理论依据(原理)? 细胞增殖 主要有:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等 根据细胞的生理生化代谢特点,人工配制而成,为细胞提供一个近似体内生存环境,又便于控制和标准化操作 基本成分 各种碳水化合物(糖)、氨基酸、维生素、无机盐、生长因子、激素等 常用培养液 几十种 定义 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养. 3、克隆培养法(细胞克隆) 最基本要求:保证分离出的细胞是一个而不是多个 连续细胞系、肿瘤细胞的克隆易于原代细胞、有限细胞系 提高细胞克隆形成率的措施: 主要用途:从普通细胞系中分离出缺
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