《抗炎受试物A对溃疡性结肠炎大鼠模型的研究本科生毕业论文》.docVIP

本科生毕业论文（设计） 题 目：抗炎受试物A对溃疡性结肠炎大鼠 模型的影响 学 系： 药学系 专 业： 药 学 表一 本科毕业论文（设计）开题报告 论文（设计）题目：抗炎受试物A对溃疡性结肠炎大鼠模型的影响 背景与意义 炎症性肠病（IBD，Inflammatory bowel disease）是一组原因未明的慢性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠炎（UC，ulcerative colitis）和克罗恩病(CD，Crohn’s disease)。大约10%的结肠炎症尚不能区分是CD或UC，在西方国家称为不明确的结肠炎。有专业医学调查机构经过随访跟踪研究，发现这些不明确结肠炎患者大多数发展称为UC，其临床症状多样化，但以腹痛、腹泻为主要肠道症状，病变可累及胃肠道任一部位，但结肠被侵犯最多。 随着我国人民生活水平的不断提高，人民的生活习惯出现了质的变化，快速的生活节奏成为现今社会的主旋律，然而我国炎症性肠病病人近年来的发病率亦不断上升，但正因此溃疡性结肠炎是一种原因未明的结直肠炎性病变，随着病程延长，倘若得不到针对性的治疗，病程会不断的加重，且癌变风险也随之增加。但目前由于溃疡性结肠炎临床病例积累需较长的时间，存在一定难度，建立溃疡性结肠炎的动物模型起到了重要作用。目前关于溃疡性结肠炎动物模型较多，近年来，有研究者发现，使用TNBS诱发溃殇性结肠炎动物模型，造模成功率高，而且造模成功的动物模型出现自愈的现象低，动物模型的病症症状与人类症状相似。通常情况下，TNBS用量为100~150 mg/kg体重，浓 度在50%以上的乙醇为4~5ml/kg体重。采用本方法复制 的模型，动物结肠炎症和溃殇至少维持7~8周。其中，1~3周为急性期改变，以中性粒细胞浸润为主;4~8周为慢性炎症改变，浸润细胞主要为淋巴细胞和浆细胞。病理改变主要表现为结肠组织溃殇形成，肠壁增厚，教膜及黠膜下层大量炎症细胞浸润，肉芽组织及隐窝版肿形成。在检测项目中，本模型采用的中性粒细胞髓过氧化物酶MPO是近年来临床广泛采用的一种诊断指标。在急性炎症期，肠壁主要为中性粒细胞浸润，故MPO活性增加;炎症向慢性转化后，则以淋巴细胞浸润为主，MPO活性即明显下降活性与结肠急性炎症的严重程度呈正相关，是评价急性期严重程度及鉴别急、慢性炎症的重要指标之一。 在第一阶段的动物造模成功后，论文实验的第二阶段就是药物治疗阶段。本论文实验选择治疗溃疡性结肠炎模型动物的药物是受试物A，对肠壁的炎症有显著的抑制作用，但是，因为专利版权等因素，抗炎受试物A的相关信息不可公布。 研究目的 本论文研究中，我们通过注射100mg/kg体重的TNBS乙醇溶液建立溃疡性结肠炎的动物模型，然后对造模成功的动物进行抗炎受试物的治疗，得到相关的数据结论，并初步探究溃疡性结肠炎相关病症症状及发病机制，与抗炎受试物对溃疡性结肠炎治疗机制情况，以此为探究人类溃疡性结肠炎发病机制与治疗机制提供一定的线索。 方案与材料 本论文选择50只，180～200g SD雄性大鼠，使用TNBS乙醇溶液灌肠复制溃疡性结肠炎模型。将造模成功的大鼠随机分为模型对照组，受试物低、高剂量组，阳性对照组，10只/组，灌胃给药，1次/d，连续10 d。取结肠组织进行MPO和病理检测。实验全过程与SPF级动物房中进行，所有实验环境与实验工具经过严格消毒使用，相关动物实验操作经过相关资质人员培训并通过测试，并且符合国家相关标准，这些实验条件由广东省医学实验动物心提供。实验过程中，每天记录大鼠体重、皮毛、精神状态、排便情况及相关日常观察。实验结束前一天动物禁食12h，不禁水。处死大鼠，截取自肛门向上10 cm的结肠，沿肠系膜纵轴剪开，用冰生理盐水反复冲洗干净，取一小部分肉眼观察病变明显的部位以福尔马林固定，进行组织病理学检查，另取一小部分肉眼病变明显的部位-80℃冻存，每组随机抽取6只动物的标本，检测各结肠组织MPO的变化。 时间 内容 备注 20110819 资料积累、实验方案编写 方案编写阶段 接收动物、编号、称重 造模阶段 20110822 检疫观察 称重，禁食 随机分组，造模 20110907 每天给药、称重、观察 治疗阶段 实验结束 20110914 酶活性测定，病理测定 检测阶段 20110920 整理资料与数据，写报告 结论分析阶段 预期研究成果 深入认识到溃疡性