肿瘤细胞培养.pptxVIP

肿瘤细胞的培养一、肿瘤细胞培养技术二、肿瘤细胞的培养三、体外培养肿瘤细胞的生物学检测四、肿瘤细胞的冻存、复苏与运输五、总结一、肿瘤细胞培养技术1、取材肿瘤细胞培养材料主要来源于外科手术或活检的瘤组织。取材部位非常重要体积较大的肿瘤组织中央常有退变或坏死区，取材时应去掉坏死组织，故应去瘤体的周围瘤组织做培养，癌性转移的淋巴结或癌性胸腹水是较好的培养材料。取材后应尽快进行培养，如因故不能立即培养，可按正常组织储存方法保存，将组织剪成1mm3左右的小块，放入培养液中，置4℃保存，但存放时间不宜超过24h。取材时应注意无菌操作。类固醇细胞瘤一、肿瘤细胞培养技术2、分离培养液中1mm3的组织块，仅有少量处于周围的细胞可能生存和生长。若要获得大量生长良好的细胞，须将组织分散开，使细胞解离出来。目前分散组织的方法有机械和化学两种，要根据组织种类所需和培养要求，采用适宜的手段。机械法：机械分散发、剪切分离法消化分离法：胰蛋白酶消化法、胶原酶法一、肿瘤细胞培养技术2、分离剪切分离法:在进行组织块移植培养时，可以采用剪切发，即将组织剪或 切成小块然后分离培养。步骤：1、首先将经修整和冲洗过的组织块放入小烧杯中，用剪刀反复剪 切组织至似糊状。 2、用吸管吸取缓冲液或无血清培养液加入烧杯中，反复轻轻吹打， 低速离心去上清剩下的组织小块即可用于培养。一、肿瘤细胞培养技术2、分离胰蛋白酶消化法：适用于消化