2009国家自然基金羟基喜树碱标书.doc

10-羟基喜树碱对类风湿关节炎患者T淋巴细胞抑制作用的研究 一、项目的立项依据及研究内容 （一）、立项依据 类风湿关节炎是一种多系统受累的自身免疫病，发病率和致残率均较高。 类风湿关节炎(rheumatoidarthritis，RA)是一种以滑膜炎症和关节结构破坏为特征的慢性炎症性疾病，临床表现为受累关节疼痛、肿胀及功能障碍。类风湿关节炎的发病率为0.132 %～0.138 %[1]，在我国约有400-500万RA患者，约50%的病人在1-2年内出现关节破坏，大多数患者会出现不同程度的关节功能受损及关节畸形。该病是造成我国人群（尤其是青壮年人群）残疾及丧失劳动能力的主要疾病之一。给患者本人、家庭和社会造成了沉重的负担。 目前治疗类风湿关节炎的药物存在毒副作用较大，部分患者疗效差等缺欠。 RA最具特征的病理改变是自身免疫功能紊乱导致的滑膜炎和血管翳的形成，临床病情呈进行性发展，最终导致关节结构破坏及关节功能丧失，RA属于多系统受累的自身免疫病，除影响关节功能外，亦可造成其他脏器功能损害，如肺间质纤维化、血管炎及肾功能受损等。目前免疫抑制剂和生物制剂是控制RA病情发展的主要药物。 免疫抑制剂或改变病情的抗风湿药被认为能够控制RA的病情进展而广泛用于临床治疗，常用药物包括甲氨蝶吟、柳氮磺胺吡啶、抗疟药、来氟米特、环孢素A、硫唑嘌呤及环磷酰胺等[2]。但是，长期的大规模循证医学证据表明上述药物的有效率较低，仅能改善部分患者的临床症状，而阻止骨质破坏的作用较弱。另外，上述药物存在明显的毒副作用，如肝肾功能损害及骨髓抑制等。由于这些问题的存在，给上述药物的应用带来了很大的局限性。 在生物制剂方面：采取针对TNF-ａ、IL-6等促炎因子的拮抗剂治疗RA虽取得了一些令人鼓舞的进展，但仍有部分病人对这些生物制剂反应欠佳，或出现明显的不良反应。即使是疗效好的患者，如要长期控制RA需长期用药，由于此类药物价格昂贵，长期用药必将造成沉重的经济负担，同时可使感染和肿瘤发生率增加。目前国内外常用的生物制剂包括英夫利西单抗、肿瘤坏死因子α受体融合蛋白及阿达木单抗等，但是，这些药物的应用存在明显的局限性，如不能应用于肝炎病毒携带者、结核菌感染者、近期恶性肿瘤患者等。另外，该类药物的长期应用存在药物耐药问题，同时也大大增加了患者机会性感染的发生率[3-8]。 10-羟基喜树碱在肿瘤治疗中取得良好效果。 喜树碱(camptothecin ,CPT) 主要来源于我国特有的植物珙桐科喜树,1966 年由Wall[9]等首次从我国引种的喜树干中分离得到, 并最早报道其具有抗癌活性。但直到1985 年,Hsiang 等揭示了喜树碱抑制拓扑异构酶I( Topo I) 的新作用机制[10],该药才引起了国内外医药界的极大重视,并成为世界性研究热点。 10-羟基喜树碱（10-HCPT）是20 多个喜树提取单体中抗癌作用最强的微量生物碱，可以作为DNA 合成期(S期)的特异性抗癌药物，在临床上10-羟基喜树碱主要用于多种实体肿瘤，如胃癌、原发性肝癌、慢性粒细胞白血病、直肠癌、膀肤癌等的防治。 最近研究显示，10-HCPT的抗癌作用机制主要有以下几方面：1）阻断肿瘤细胞Topo-I。DNA拓扑异构酶(DNA-Topo)是直接参与或影响DNA复制、转录的关键性酶类。Topo-I对维持DNA机构和功能以及保证细胞的存活至关重要，并与肿瘤细胞分化、增殖关系密切，因此DNA-Topo-I抑制剂能选择性杀伤增殖的肿瘤细胞。2）10-HCPT可显著抑制组蛋白H1和H3磷酸化，其对肿瘤细胞的致死作用至少部分与其抑制组蛋白Hl和H3磷酸化有关，在机体多种调控协同作用下，可最终导致肿瘤细胞死亡。3）10-HCPT亦可和Topo-I/单链DNA复合体形成稳定的结合体，抑制Topo-I解旋和再连接功能，诱导DNA不可逆性断裂，启动细胞周期阻滞和凋亡信号，诱导S期肿瘤细胞发生凋亡[9-14]。 国内有大量资料表明，10-HCPT与抗肿瘤药物联合用于治疗肿瘤有明显优越性，表现为抗肿瘤作用强，疗效高，毒副作用小，对骨髓抑制作用小，并与其他抗肿瘤药物无交叉耐药性等优点。 10-羟基喜树碱用于治疗类风湿关节炎的理论依据。 长期以来，免疫抑制剂一直是RA治疗的基础。如甲氨蝶吟、来氟米特、环孢素A、硫唑嘌呤及环磷酰胺等。上述药物的应用一定程度上控制了RA的病情进展，原因在于RA具有类似于“局部恶性肿瘤”的增生性和破坏性的特点。以甲氨蝶吟为例，免疫抑制剂中的甲氨蝶吟最早是用于治疗癌症的化疗药物，由于偶然发现其具有免疫抑制作用而逐渐应用到RA的治疗上，疗效肯定，并成为改善病情的抗风湿药(DMARDs)的代表药物，是目前治疗RA的基本药物。研究表明低剂量的MTX可对体外培养的滑膜细胞及淋巴细胞的生长有抑制作用，并呈剂量依