常见病原真菌_培训课件.ppt

* 真菌培养 毛霉目中的致病菌在许多真菌培养基上快速生长 对放线菌酮敏感，故培养基内不用此药，可加抗生素抑制细菌生长。 置于25℃～30℃培养，根据镜下特征鉴定菌种。 * * * * * 血浆?－1，3－D葡聚糖检测（G试验）原理 ?－1，3－D葡聚糖（BG）是酵母和丝状真菌细胞壁的多聚糖成分，原核生物、病毒和人体细胞都不存在这种多聚糖。因此，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI 的标志。 马蹄鲎凝血系统中的凝血酶原G因子能识别这种葡聚糖，是BG 的天然检测者。 G 因子的α亚基特异性识别BG 后，可激活血清凝固酶原上的β亚基，形成凝固酶，使凝固蛋白原转变为凝胶状的凝固蛋白，通过光谱仪测量其光密度来进行量化，B G 水平可精确到1 pg/ mL 。 * G试验的临床应用与意义 判断标准 参考临界值：13.7pg/ml 真菌定植：13.7～20pg/ml 深部真菌感染：＞20pg/ml 意义 早期诊断除结合菌、隐球菌外的深部真菌感染，如念珠菌、曲霉、镰刀霉、丝孢酵母等。 敏感性与特异性为80％以上。 * G试验的临床应用评价 FDA于2004年批准于应用侵袭性真菌感染的早期辅助诊断 检测方法快速、简便，1.5小时就能出结果 目前主要用于深部念珠菌和曲霉感染的诊断、高危人群的检测、疗效及预后的评价 缺点为不能将病原菌分类，不适合流行病学的研究 * G试验的应用与评价 对于念珠菌血症, G试验检测是首选检查 J.Clin.Microbiol.2008,46:1009–1013 Pazos等报道5例确诊IFI及3例临床诊断的IFI患者，发现BG值升高出现在发热、咳嗽、胸痛等症状和肺部CT检查发现以前 。 平均早于发热5d 早于呼吸道症状平均10.7d 早于CT检查平均9.3d Clin Microbiol，2005，43(1):299—305 * G试验的应用与评价 Odabasi等对确诊为粒细胞缺乏人群进行为期3周每周2次采血检测及临床观察 发现：BG值开始高于正常值的时间比最后确诊为IFI或临床诊断IFI平均提前了10d Clin Infect Dis，2004，39(2)：199—205 * 第四军医大学西京医院张建芳等 深部真菌感染组1-3-β-D葡聚糖（35例）： 54.06±36.13 pg/ml, 最低值17.4pg/ml 正常对照组（ 健康人）1-3-β-D葡聚糖检测值 （30例）: 2.83±2.57 pg/ml 中华医院感染学杂志，2005，15（3） * 中国医科大学第一临床医院刘芳等 14例侵袭性真菌感染患者 ： BG值为105.02±82.22 pg/ml 13例健康志愿者: BG值为6.65±1.01pg/ml 灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是92.86%、89.58%、72.22%、97.73% 中国医师进修杂志，2009，32（1） * 解放军第四○一医院吕沛华 等 IFI患者30例：BG值为29.5±11.5 pg/ml 细菌性肺炎20例：BG值为13.1±5.2pg/ml 真菌口咽定植者20例： BG值为12.7±5.1pg/ml 健康人15名：BG值为11.7±3.5pg/ml 中华结核与呼吸杂志，2007，30（1） * G试验的影响因素 避免污染：应严格按照操作规程，无菌操作，确保使用试管等器具无菌、无热原 含有葡聚糖成分或类似结构： 血液透析、腹膜透析(应用纤维素膜) 纱布或其他医疗物品（外科手术） 某些品牌的静脉制剂（白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白等） 抗肿瘤药物（香菇多糖，裂殖菌糖） 某些细菌败血症患者（尤其是链球菌败血症） * * 真菌病诊断 感染病专家 临床医师 微生物检验人员 生产研发者 病理诊断医师 * 谢谢大家! * 直接镜检 脑脊液直接墨汁涂片 * 真菌培养 * 实验室检查-其它检查方法 脑脊液检查： 中枢神经系统隐球菌病脑脊液压力增高, 外观正常或微混, 白细胞数增多, 早期以中性粒细胞为主, 中后期以淋巴细胞为主。糖和氯化物在早期变化不明显, 中后期可明显减少。蛋白含量在中后期增高。 抗原检查： 乳胶凝集试验检测脑脊液及其它体液标本中新生隐球菌荚膜多糖抗原可简便快速有效诊断隐球菌性脑膜炎 * 阴性 阳性 乳胶凝集试验 * 隐球菌乳胶抗原凝集试验 诊断及推测隐球菌病的预后 99%中枢神经系统隐球菌感染者为阳性 90%非中枢神经系统(肺﹑肾)隐球菌感染者为阳性 检测其滴度可反映治疗效果及其预后 目前,认为此法能早期﹑快速诊断隐球菌病,大