人类Foxm1b基因的原核表达.docVIP

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2016-12-08 发布于天津
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人类基因的原核表达摘要目的构建人类基因的原核表达载体表达并纯化蛋白制备多克隆抗体并用此抗体检测肝癌细胞中基因的表达为进一步研究基因的功能奠定基础方法从中下载人类基因全长序列并用软件分析其可能的抗原表位设计引物应用获得含抗原表位的基因片段重组入原核表达载体在大肠杆菌中诱导表达应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体用检测抗体滴度并用免疫细胞化学的方法检测此抗体对肝癌细胞中天然蛋白的识别结果成功构建了基因重组表达载体表达的蛋白经纯化后免疫大鼠得到了高滴度的多克隆抗体该抗体可以

人类Foxm1b基因的原核表达【摘要】nbsp; 【目的】构建人类Foxm1b基因的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,并用此抗体检测肝癌细胞中Foxm1b基因的表达,为进一步研究Foxm1b基因的功能奠定基础。【方法】从GenBank中下载人类Foxm1b基因全长cDNA序列并用Pcgene软件分析其可能的抗原表位,设计引物,应用RT-PCR获得含抗原表位的Foxm1b基因片段,重组入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体,用ELISA检测抗体滴度并用免疫细胞化学的方法检测