EffectsofIronDeficiencyonIronBindingandInternalizationintoAcidicVacuolesinDunaliellasalina预案.doc
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Effects of Iron Deficiency on Iron Binding and Internalization into Acidic Vacuoles in Dunaliella salina
缺铁的影响因素对盐藻铁结合和内化成酸性空泡
摘要
耐盐中含铁的吸收盐藻导入的一个转铁蛋白,转化为铁3价离子。最近,我们发现缺铁导致大量提高铁结合,这是相互关联的与其他三个细胞膜积累的蛋白质, 与转铁蛋白联系在一起。在本研究中,我们描述了动力学性能具有铁结合性能和确定了铁内部化。缺铁引起滴定终点可以4倍增加铁具约束力,但只有50%的提高速度也会增加对铁的吸收和铁和碳酸氢钠的亲和力,铁约束力。这些结果表明,铁不足导致积累和改变铁约束力的地方。在充分的铁吸收细胞有一个明显的滞后时间,造成铁的变形,哪一个可以被卸载结合地方。 铁是表面暴露紧紧地约束和难以置换中间铁。随后所有绑定的铁记得住的。累积的铁铁具有抑制进一步内部化。洛霉素抑制剂的抑制金属铁的吸收与内在化。铁是局部内化电镜下金属结构内被鉴定为酸性泡。内部化是伴随铁内吞作用:表面蛋白的由这些酸性泡。一种铁吸收动力学机理,提出了一种包括两个水池/部分分离约束特征铁内部化的阶段。主要参数这是由缺铁是调制铁约束能力。 我们建议铁缺陷细胞过多的铁具有约束力作为一个临时储层为随后内化铁。这一机制是尤为适合生物有机体,暴露在大波动的铁的可用性。
正文
铁是一个重要的元素为生存了所有生命生物,包括可以进行光合作用的生物体有一个特殊的要求,作为一种辅助铁的多重因素,电子传递系统。因为其较低的溶解度在有氧的解决方案,铁是公认的一个主要限制因素增生的植物和藻类。铁限制平衡,可以进行光合作用的生物体进化而来的有效率高亲和性铁吸收机制诱发在铁的局限性。两个主要机制的铁研究了基于采集植物或者在反复繁殖有机铁铁螯合物,通过膜联合,或在释放与铁离子并介绍了他们通过一个特殊的细胞受体。利用藻类出现实验动物研究院工业管理学院机制收购。铁在绿藻小球藻和衣藻和在某些硅藻,缺铁引起大的提高铁还原酶活动联系在一起的刺激高吸收率的铁的吸收,说明我的植物这是一驱动氧化还原反应铁吸收机制类似于策略后。其他藻类,如市售增厚赫氏圆石藻,利用含铁细胞调解铁吸收类似战略II植物和细菌。然而,糖朊综合识别和铁收购相关的基因在两个物种只藻类,衣藻和盐藻。 几个分量铜依赖铁吸收的机理识别和特征为C。 他们在关闭一个铁氧化酶和铁的铁的透膜酶,暗示高亲和力铁吸收, 在酵母使用C控制相似。 一个不同的高亲和力铁吸收机理在耐盐藻鉴定盐藻,这是基于铁约束力和内部化通过膜相关转铁蛋白像蛋白质。 在过去的研究中,我们进行了论证铁吸收并具有约束力,盐藻像D动物转铁蛋白动力学特征和锥的过程包括两种不同的阶段,具有约束力内化3价铁离子,可以被解决他们不同的温度依赖性。剥夺或高铁盐藻一个小执教盐度归纳刺激铁这是与吸收积累纺。然而,还没有动力学机理和现场的铁。内化确认。在最近的一项研究中,我们发现铁邻苯二甲酸二乙酯相归纳在盐藻大量增加,铁约束能力和提高装订相关的血浆。另有三个积累膜蛋白质,这些蛋白质被发现的联想与纺:第二次转铁蛋白称为数据传输函数。
图1.变形的铁使时间滞后于铁吸收。一、时间上的滞后铁吸收在盐藻细胞。样品5铁缺陷或铁充分细胞被孵化与59铁以3比1柠檬酸钠在室温下为指定时间点,来分析内化铁的含量。箭头表明滞后时间在铁充分细胞。 B,时间上的滞后铁充分细胞。 样品53个107细胞不是处理(发布会后)或预培养 1 h在光在介质铁缺陷,铁约束地点卸货占领(PI)或20分钟在冰饱和铁柠檬酸上传网站铁约束绕道跟随通过洗涤(Fe-Cit。)。这些治疗后,细胞被孵化与59铁以3比1在室温下柠檬酸为表示时间和分析为内化铁的含量。C,没有时间上的滞后铁缺陷细胞。 在B处理平均3(一个)或2(B和C)分离实验。
在这部作品中,我们研究了铁约束的规定和吸收。具体地说,我们描绘了动力学变化具有吸收铁的回答要熨剥夺或细胞内达到饱和铁商店。我们的分析表明,铁剥夺或过于调制导致大的变化,铁具约束力,建议,这是最关键的参数在规定的在铁吸收盐藻,D .我们也定位网站铁在酸性空泡内部化。物理逻辑意义的动态变化约束铁进行了讨论。
结果
盐藻细胞包含外部约束铁
课程的时间对铁的吸收在盐藻揭示一个最初的滞后时间15到20分钟。这次时滞是根源对照细胞,培养铁,但没有在铁缺陷细胞(图1)。我们发现预培养控制四赛利娜细胞在30 - 60分钟铁缺陷中差不多这个明显的滞后时间完全消除(图1 B)。相反,预培养细胞的介绍了一个类似的滞后时间铁在发作的铁吸收(图1 C)。这些结果表明,表象滞后时间的铁吸收导致在盐藻铁。
测试是否包含d细胞前直
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