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第十七章 细菌检验的商品化、自动化设备本章考点: (1)微量生化反应系统 (2)自动化装置
第一节 微量生化反应系统
一、常用的微量生化反应系统 根据细菌的不同生物学性状及其代谢产物的差异,可采用多种生化反应系统鉴定细菌,现已有商品化的成套产品,它多由10~24项生化指标组合而成,通过对结果的判定,得出一个3~7位的数据,查阅编码手册即可获得相应的细菌名称。常用的微量生化反应系统有以下几种: (一)Micro-ID系统 本系统主要用于肠杆菌科的细菌鉴定。它是一块带有15个反应池的塑料板,每个反应池含有一种生化反应培养基及试剂。 (二)API系统(目前较常用的微量生化鉴定系统) API系统为一块塑料板,上有20个小杯,每个小杯装有不同的生化反应培养基和指示剂。
API系统 鉴定范围 API-20E 肠杆菌科细菌 API-20NE 非肠杆菌科细菌 API Staph 葡萄球菌属和微球菌属细菌 API Strep 链球菌属细菌 API Coryne 棒状杆菌属细菌 API 50CHB 芽胞杆菌属等革兰阳性杆菌 API NH 奈瑟菌属、布兰汉菌属和嗜血杆菌属细菌 API Canpy 弯曲菌和螺杆菌 API-20A 厌氧菌 (三)Minitek系统 该系统为带有l2个凹孔的塑料盘。包括34种生化反应培养基及指示剂的滤纸片。 (四)肠杆菌-MBl2E系统 该系统为一块96个凹孔的塑料板,分8排。可同时鉴定8份标本。每孔含有一种干燥生化培养基,可提供12项生化反应。 (五)氧化发酵鉴定系统 该系统主要有氧化发酵管可应用于非发酵菌,也可用于气单胞菌等一部分发酵型细菌的鉴定。 二、自动化装置 (一)半自动微生物鉴定和药敏系统 1.VITEK—ATB (Automicrobic系统) (1)原理:将肉眼观察的结果输入电脑,结果与数据库内的细菌条目比较,自动得到鉴定结果。ATB敏感试验采用半固体培养基,不同的药敏试条含有不同种类抗生素。在24小时内通过观察有无细菌生长以判断药敏试验结果。 (2)操作方法:挑取1至数个纯菌落制备为0.5麦氏单位菌悬液,接种试剂条,经35℃孵育18~24小时,观察结果。 2.Microscan Panel使用测试板及快速接种系统,人工判读后将其结果输入电脑,得出结果。 (二)全自动微生物鉴定和药敏系统 1.VITEK系统:该系统可鉴定各种细菌(包括厌氧菌)、酵母菌及细菌的药敏试验。类型有Vitek-32及Vitek-60及VitekⅡ(有两种规格)。 仪器采用数码鉴定原理,每个鉴定卡有30项反应,每3个反应为一组,可得一组10位数的数码。VitekⅡ采用快速荧光法测定细菌。Vitek系统有高级专家系统,对药敏结果进行解释性判读。 2.MicroScan自动微生物分析系统:该系统可鉴定各种细菌(包括厌氧菌)、酵母菌及细菌的药敏试验。类型有WalkAway-40,WalkAway-96。 仪器应用传统呈色反应法,采用快速荧光法测定细菌。药敏部分采用比浊法进行测定。鉴定板有普通和快速两种,后者采用更为敏感的荧光底物,采用酶学方法分析。
第二节 血培养系统
一、半自动培养仪 BACTECA60系统专用于快检血液、脑脊液、胸水及其他正常无菌体液中的细菌。将待测标本接种于含14C-底物的培养瓶中,活菌将利用14C-标记底物而产生14C02,测定气体量并换算成数值。 培养瓶种类有需氧培养瓶、厌氧培养瓶、L型菌培养瓶、结核菌药敏瓶等。缺点是放射性废弃物的处理较为困难。 二、全自动血培养仪 全自动血培养仪软件功能全,操作简便,具有数据连网共享功能。培养瓶放入仪器后即开始连续孵育、轻度震荡培养和自动检测的全自动过程。 1.BACTEC9000系列:包括9240型(240瓶)、9120型(120瓶)和9050型(50瓶)三种。 BACTEC9000系列利用荧光探测技术(荧光增强法):全自动连续检测培养瓶内微生物代谢引起的CO2浓度变化,而CO2浓度的改变可直接激活培养瓶底部包埋的对CO2浓度变化高度敏感的荧光物质,在二极管的激发下荧光物质释放荧光,荧光强度变化可直接反应培养瓶内CO2浓度变化。以判定是否有微生物生长繁殖,仪器每十分钟自动进行质控校正,由电脑分析判断细菌培养阴阳性,阳性者发出警报。培养瓶有标准及含树脂(有吸附抗生素作用)的需氧、厌氧瓶、儿童瓶,有真菌培养瓶、分枝杆菌培养瓶。 2.BacT/Alert系统:该系统为一种全自动微生物培养和监测系统,有120瓶和240瓶两种规格。培养瓶种类有需氧培养瓶、厌氧培养瓶、小儿培养瓶和抗生素中和瓶等。
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