第4节 定量及定性分析幻灯片.pptVIP

第四节 定性与定量方法 一、定性鉴别 二、单组分定量方法 三、多组分测定方法 四、光电比色法 一、定性鉴别 若两个化合物相同，其紫外光谱应完全相同； 紫外光谱相同，结构不一定完全相同。 一、定性鉴别 （一）比较最大吸收波长?max及吸收系数? (E)的一致性 具有相同发色团的不同分子结构，有时可产生相同的紫外吸收光谱，但它们的吸收系数是有差别的，所以在比较?max的同时，还要比较?max和 E1cm1% (二)比较吸光度比值的一致性 有的物质吸收峰较多，就规定在几个吸收峰处吸收度或吸收系数的比值作为鉴别标准 VB12 二、单组分定量方法 绝对法（吸光系数法） c=A/El 标准曲线法 标准溶液 C1, C2, C3, C4, C5， 测定吸收度值 A1, A2, A3, A4, A5 测定样品 AX cX 对照法 同条件配制 C标， C样 同条件测定 A标， A样 C样= C标A样 / A标 外标法定量 配制一系列已知浓度的标样 外标法定量 实际色谱图 分光光度法测定苹果酒中的高级醇  酿酒科技，2005第5期 分光光度法测定蒸馏酒及配制酒中杂醇油 乙酰丙酮分光光度法测定啤酒中甲醛 中国卫生检验杂志，2005，15卷，第4期 分光光度法测定银杏酒中总黄酮的含量 南京中医药大学学报，2005，21卷，第2期 白酒中甲醇含量的测定 气相色谱法 品红亚硫酸比色法 品红亚硫酸比色法 甲醇＋高锰酸钾　　　　　　甲醛 　 　　过量用草酸还原 　　　　　　　品红亚硫酸生成　　　　　　　　　　　　蓝紫色化合物 （测吸光度） 白酒中甲醇含量的测定 显色剂：品红亚硫酸(比色法) 显色温度：20度 显色时间：30分钟 显色灵敏度条件：乙醇浓度6%时较为灵敏 测定波长：590nm 特殊性：用目视比色法 操作注意 1、使用２０ml的比色管 2、移液管操作要准确 3、防止比色管盖子摔破 4、控制好温度与时间 5、显色反应在乙醇含量为６％时最灵敏，注意样品酒样的稀释度 数据处理：外标法 用Excel处理，画图 白酒中杂醇油含量的测定 显色剂：对二甲氨基苯甲醛(比色法) 显色温度：沸水浴后，冰水浴冷却 显色时间：15+10分钟 显色灵敏度条件： 测定波长：520nm 特殊性：显色剂与丙醇、异丙醇、正丁醇不产生显色反应 白酒中铅的测定（氰化钾） * * * * * 比较最大吸收波长?max及吸收系数? (E)的一致 比较吸光度比值的一致性 比较光谱的一致性 标准比值: 207/115=1.80 标准比值: 207/115=1.80 E标准值来自7台以上不同仪器所测得的平均值 （三）比较光谱的一致性 两个化合物若是相同的，其吸收光谱应完全一致。 在鉴定时，试样和标准品以相同浓度配制。在相同溶剂中，分别测定吸收光谱图，比较光谱图是否一致。 ?max E1%1cm ? 可的松 238±1nm 390 1.57?104 波泥松 238±1nm 390 1.57?104 定性原则 对比结果相同，可能是同一物质。 对比结果不同，肯定不是同一物质。 吸光度（A） 浓度（C） Ai Ci 外标法测定样品的量 标准曲线 例1：维生素B12的水溶液在361nm处的E1%1cm值为207，盛于1cm的吸收池中，测得溶液的A值为0.414，溶液的浓度为多少？ 解： C = = = 0.002g/100ml A El 0.414 207×1 注意：C的单位 例2：维生素B12样品2.50mg用水溶成100ml后，盛于1cm吸收池中，在361nm测得A值为0.507，求样品百分含量。 解： 例3：维生素B12注射液的含量测定：精密吸取维生素B12注射液2.5ml，加水稀释至10.0ml。另配制B12标准液：精密称取B12标准品25mg，加水溶解并稀释至1000ml，摇匀。在361nm处，用1cm吸收池分别测得样品溶液和标准溶液的A值为0.508和0.518，求B12注射液浓度。 解：C标=25×10－3×100/1000（g/100ml） 光谱实验室,2005,22卷，第2期 品红亚硫酸比色法 5.0-v 3.7 3.9 4.1 4.3 4.5 4.7 水　 ml 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 无甲醇酒精　　ml 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 mg 酒样 V ml 1.0 0.8 0.6 0