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米氏常数Km的意义: 由米氏方程可知,当反应速度等于最大反应速度一半时,即V = 1/2 Vmax,Km = [S] 上式表示,米氏常数是反应速度为最大值的一半时的底物浓度。 因此,米氏常数的单位为mol/L,或mmol/L。 不同的酶具有不同Km值,它是酶的一个重要的特征物理常数。 Km值只是在固定的底物,一定的温度和pH条件下,一定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的Km值。 Km值表示酶与底物之间的亲和程度:Km值大表示亲和程度小,酶的催化活性低; Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。 ③ 米氏常数的测定 基本原则: 将米氏方程变化成相当于y=ax+b的直线方程,再用作图法求出Km。 例:双倒数作图法(Lineweaver-Burk法) 米氏方程的双倒数形式: 1 Km 1 1 — = —— . — + —— v Vmax [S] Vmax 4. 维生素PP(B5)与NAD+、NADP+ 烟酸 烟酰胺 ? 维生素PP包括尼克酸(又称烟酸)和尼克酰胺(又称烟酰胺)两种物质。在体内主要以尼克酰胺形式存在,尼克酸是尼克酰胺的前体。 维生素PP能维持神经组织的健康。缺乏时表现出神经营养障碍,出现皮炎。 NAD+ (烟酰胺-腺嘌呤二核苷酸,又称为辅酶I) 和NADP+(烟酰胺-腺嘌呤磷酸二核苷酸,又称为辅酶II )是维生素烟酰胺的衍生物,它们是多种重要脱氢酶的辅酶。 NAD+: R=H NADP+: R=PO3H2 5. 维生素B6和磷酸吡哆醛 维生素B6包括吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺。 维生素B6在体内经磷酸化作用转化为相应的磷酸酯,参加代谢的主要的是磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺。磷酸吡哆醛是氨基酸转氨作用、脱羧作用和消旋作用的辅酶。 6. 生物素和羧化辅酶 生物素是B族维生素B7,它是多种羧化酶的辅酶。 生物素的功能是作为CO2的递体,在生物合成中起传递和固定CO2的作用。 生物素 生物素-BCCP复合物 赖氨酸ε-氨基 活性部位 7. 叶酸和叶酸辅酶 维生素B11又称叶酸,作为辅酶的是叶酸加氢的还原产物四氢叶酸。 四氢叶酸的主要作用是作为一碳基团,如-CH3, -CH2-, -CHO 等的载体,参与多种生物合成过程。 8. 维生素B12和B12辅酶 维生素B12又称为钴胺素。维生素B12分子中与Co+相连的CN基① 被5’-脱氧腺苷所取代,即辅酶B12;② 被甲基取代,即甲钴胺素。 维生素B12辅酶的主要功能是:①作为变位酶的辅酶,催化底物分子内基团(主要为甲基)的变位反应;②促进甲基的转移作用; ③维持 -SH的还原状态;④某些氨基酸的生物合成;⑤维持造血机构的正常运转。 9. 硫辛酸 硫辛酸是少数不属于维生素的辅酶。硫辛酸是6,8-二硫辛酸,有两种形式:即硫辛酸(氧化型)和二氢硫辛酸(还原型)。 氧化型 还原型 硫辛酸在丙酮酸代谢的多酶系中参与脂酰基的产生和转移作用。 10. 维生素C 维生素C能防治坏血病,故又称抗坏血酸。在体内参与氧化还原反应,羟化反应。人体不能合成。 p. 261-262 L-抗坏血酸 脱氢抗坏血酸 11. 辅酶Q(CoQ) 辅酶Q又称为泛醌,广泛存在于动物和细菌的线粒体中。 辅酶Q的活性部分是它的醌环结构,主要功能是作为线粒体呼吸链氧化-还原酶的辅酶,在酶与底物分子之间传递电子。 类异戊间二烯 酶 的 作 用 机 制 第 四 节 一、酶作用机制概述 1.酶催化作用的本质:降低反应活化能 2.酶催化作用的中间产(络合)物学说 酶(E)与底物(S)结合生成不稳定的中间物(ES),再分解成产物(P)并释放出酶,使反应沿一个低活化能的途径进行,降低反应所需活化能,所以能加快反应速度。 E+S P+ E ES 能量水平 反应过程 ?G ?E1 ?E2 二、酶的活性中心 1. 活性中心:酶分子中直接和底物结合并起催化反应的空间部位。由结合部位和催化部位组成。 结合部位(Binding site):酶分子中与底物结合的部位或区域一般称为结合部位。 催化部位(Catalytic site): 酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位。 通常将酶的结合部位和催化部位总称为酶的活性部位或活性中心。 结合部位决定酶的专一性, 催化部位决定酶所催化反应的性质。 2. 酶活性中心特点 活性中心只占酶分子总体积很小一部分; 活性中心与酶的特定空间构象密切相关; 酶活性中心与底物的结
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