化学神经解剖学.pptVIP

化 学 神 经 解 剖 学 Chemical Neuroanatomy  概 述 化学神经解剖学的创立与兴起 Loewi于上世纪20年代初期首先在蛙心灌流实验中证明了神经化学传递的存在。近80年来，神经化学的研究取得了巨大进展。继发现Ach和NA神经递质后，随后又陆续发现了其它单胺类神经递质(如DA和5-HT)和一些兴奋性和抑制性的氨基酸(如Glu和GABA)。近年来有关神经肽的研究使神经化学传递的概念得到了很大的发展，到90年代中期新神经肽的发现已达到七十余种，而且数量还在不断增加。它们或调制传统神经递质的活动，或与传统递质共存于神经元内参于神经调节。 定 义 研究各种神经信息物质在中枢神经系统的定性、定位、定量及其发生演变和功能意义。是神经科学中一个重要的研究领域。 传统神经解剖学与化学神经解剖学的比较 传统神经解剖学 化学神经解剖学 研究内容 细胞构筑 神经细胞的化学性质 核团定位与构筑 递质定位与通路,受体及其他神经 纤维联系 信息物质，神经元回路的化学编码 研究方法 Nissl 染色 酶组织化学 Golgi镀银 放射组织化学和荧光组织化学技术 各种束路追踪技术 免疫组织化学和免疫电镜 常规电镜 原位杂交技术等 目 标 神经系统结构“蓝图” 神经系统化学构筑“彩色图谱” 研 究目的 用提纯的抗体作为一种组织探针来检测神经系统各个部位组织切片中（神经细胞、胶质细胞和纤维）的抗原物质（包括酶、神经递质、神经调质或神经肽类、类固醇、膜性结构成分等），证实和发现新的神经信息物质。 将定性研究与束路追踪技术结合起来，探明特定的中枢投射系统的化学性质，把神经组织细胞的定位、定性、定量研究结合起来。 研究神经递质、神经调质（肽类）的共存现象。 把中枢神经系统的形态、机能研究与临床应用结合起来，阐明神经系统功能异常和某些疾病的发病机制，从而对临床医学的诊断、治疗提供线索和依据，开辟新的治疗途径以及保护性预防措施。 在超微结构的电镜水平下研究神经元的构造及突触联系的化学性质。 化学神经解剖学可作为个体发育和种系发生的研究内容。 区分神经细胞和神经胶质细胞及其结构成分，还可以区分胶质细胞的不同类型。 主 要 研 究 方 法 组织化学法 能鉴别神经组织和神经细胞的化学成分，但不能很好的确定神经通路。 1.酶组织化学法（如AchE法） ? 2.荧光组织化学法（如甲醛诱发荧光组化 法用于单胺类的检测） 3.原位杂交组织化学法（ISHH） 免疫组织化学法 (immunohistochemistry method) 是利用抗原与抗体结合的原理，定性、定位、定量检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的方法。特异性强、敏感度高、发展十分迅速，应用也十分广泛，成为当前生物学和医学众多学科的重要研究方法。 免疫荧光法 酶标记抗体法（如PAP法，ABC 法） ?A蛋白法 免疫电镜法 双重免疫标记技术（免疫荧光双重标记法，免疫酶双重标记法，PAP法双重标记法，免疫电镜双重标记法如PAP和胶体金法） 神经束路追踪法 利用神经细胞轴浆运输的原理，追踪神经纤维投射途径或神经元的传出和传入联系的主要方法。缺点是不能识别神经元及轴突束路的化学性质。 辣根过氧化物酶法（HRP法） 荧光化合物标记法 植物凝集素法（ WGA， PHA-L ） 细菌毒素法（霍乱毒素CB，破伤风毒素） 病毒示踪法（疱疹病毒，杆形病毒如狂犬病毒） 放射自显影神经追踪法（ARNT，应用放射性同位素3H，14C，35S） 各种方法的结合 神经束路追踪法与免疫细胞化学法的结合 多重免疫标记法 原位杂交法与免疫组化法结合 用于神经化学通路的研究和递质共存现象的研究。在确认神经元的定位和投射部位纤维联系的同时，能鉴定神经元及纤维的化学性质，为阐明神经系统复杂结构和功能提供依据。多以上述的组织化学法与神经束路追