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离体小肠段的生理特性 【目的要求】 学习离体肠段平滑肌的实验方法。 了解肠段平滑肌的生理特性。 【实验原理】 哺乳动物消化管平滑肌具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。 消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。 这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。将离体组织器官置于模拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。 胃肠平滑肌的收缩反应主要由副交感神经控制,肠肌细胞膜上富含M胆碱能受体,M受体激动剂和拮抗剂均可明显影响其收缩反应。 本实验以台氏液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性,观察药物对离体肠管平滑肌的作用。 【动物和器材】 兔; 台氏液; 常规手术器械; 张力传感器、生物信号采集处理系统 恒温平滑肌槽、支架、烧杯、气囊、肾上腺素(1:10000)、乙酰胆碱(1:10000)、阿托品针剂(1支)。 1、调试实验装置 如图,浴槽外的水浴温度为37℃,浴槽内台氏液调温至37±0.5℃。调整好台氏液充气量,(小气泡接连不断)。 2、制备离体兔肠段 用立掌或木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔。 找到胃幽门与十二指肠交界处,在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠,放入盛有预冷台氏液的表面皿内。先用注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎。 一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中。 3、开启生物机能实验系统 固定L管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增益与扫描速度,使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。 4、实验观察 (1)记录对照肠段运动曲线后,停止供气1分钟并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后,立即恢复供气。用新鲜37℃台氏液冲洗,待恢复正常。 注意作好标记 (2)记录对照肠段运动曲线后,加入25℃台氏液,并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后,立即用37℃台氏液冲洗,待恢复正常。 (3)同法加入45℃台氏液并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后,立即用新鲜37℃台氏液冲洗并待恢复。 注意作好标记 由于以上流出液中未加入药物,可以回收使用。 以下加入药物的流出液不可再用。 (4)同法,加入2滴肾上腺素(1:10000),观察并记录曲线变化。 (5)同法,加入1~2滴乙酰胆碱(1:10000),观察并记录曲线变化。 (6)加入3滴阿托品后立即加入于(5)同样剂量的乙酰胆碱,记录并观察曲线变化。同(5)比较曲线有何不同。 注意作好标记 ??? 注意事项 1. 温度控制:浴槽内台氏液要保持一定温度;加药前必须准备好更换用的37℃台氏液。 2. 游离及取出肠段时,动作要快,取兔肠及兔肠穿线时尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性,可先预冷充氧的营养液,游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。 3. 实验中始终通气。 4. 上述药物剂量只是参考,效果不明显可补加,每次加药出现效果后,必须立即更换浴槽内的台氏液并冲洗3次,待肠肌恢复正常后在观察下一项目。 5. 注意作好标记 思考题 1、本实验是否可用麻醉动物的肠段?为什么? 2、进行哺乳动物离体组织器官实验时,需控制哪些条件? 3、为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么? 4、加入阿托品后再加入乙酰胆碱,肠段活动受到抑制,为什么? 5、根据实验结果,说明平滑肌的生理特性。 探索性问题 * * *
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