第十章 DNA、RNA的生物合成幻灯片.ppt

一、真核生物mRNA的转录后加工 （一）首、尾修饰 帽子结构 （二）mRNA内含子的剪接 1. hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA (small nuclear RNA) （三）mRNA编辑(mRNA editing) ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 二、tRNA的转录后加工 （一）剪接和剪切 （二）3’端添加CCA （三）化学修饰 三、rRNA的转录后加工 ⒉ ρ因子(Rho factor) 功能 (1)能帮助 DDRP识别终止信号并停止转录 (2)具有ATP酶和解链酶活性，使RNA-DNA杂化分子解链，从而释放转录产物RNA分子 3. 转录的DNA模板 细胞内DNA不是其全长都可作为转录模板 DNA双链中，可作为模板转录成 RNA 的一条链，称为模板链(或反意义链) 同一DNA双链中与模板链相对(互补)的一条链称为编码链(或有意义链)，可见转录是不对称的 模板链=反意义链=负链 编码链=有意义链=正链 为何称模板链为反意义链 ，编码链为有意义链？ 可从下图理解： ５ …GCA GTA CAT GTC …3 编码链 3 …CGT CAT GTA CAG …５ 模板链 DNA 转录 ５ …GCA GUA CAU GUC …3 mRNA 翻译 N … 丙 － 缬 － 组 － 缬… C 肽 比较编码链和 RNA 链的碱基序列可见，除了以Ｕ代Ｔ外，其余均一致。基因组序列均以编码链(正链)表示. 不对称转录的两方面含义 ： 5 3 3 5 模板链（含结构基因） 编码链 DNA 分子上的一条链可转录，另一条不转录 模板链并非永远在同一单链上 1. 启动子（promoter） RNA 聚合酶与模板DNA结合的特定部位，是基因转录的开始部位。 一般可分为 两类 DDRP 能直接识别的启动子 需蛋白质辅助因子的帮助，DDRP 才能识别的启动子 （四）启动子及终止信号 确保转录精确而有效地起始的DNA 序列 原核生物启动子的3个功能部位 转录起始点, 常标以+1,第1个核苷酸为嘌呤核苷酸(A或G). 上游或下游, +或-表示 结合部位, 长度为7bp, 位于-10bp处,有一共有序列(-TATAAT-, Pribnow盒) RNA聚合酶的识别部位, 由约6bp, 位于-35bp, 也有共有序列(-TTGACA-) 编码链 5 3 启动子 5 MeGPPP RNA产物 原核生物启动子 转录起始部位 +1 基因转录区 -10区 TATAAT Pribnow 盒 结合部位 TGTTGACA -35区 识别部位 DNA 模板链 3 5 编码链 5 3 DNA 模板链 3 5 CCAAT CAAT盒 -70 真核生物启动子 RNA产物 转录起始部位 +1 基因 转录区 TATA TATA盒 -25 Hogness盒 结合部位 GAGCCACCC GC盒 (少数) 2. 终止信号(终止子) DNA分子中决定RNA聚合酶终止转录的特定碱基序列。 原核生物终止信号碱基组成特点 有反向重复序列 决定转录产物的回折形成茎-环(或称发夹)结构 AT富集区 GC富集区 反向重复序列 AT富集区 GC富集区 一般认为由终止子引导的转录终止是不依赖ρ因子的 (五) 转录过程 起始 延长 终止 (以大肠杆菌的转录为例） 1. 转录起始 形成转录空泡（DNA解链长约20bp) DDRP(σ亚基)辨认并结合于启动子部位 由DDRP催化，头2 个NTP直接在起始点形成 第一个磷酸二酯键(不需引物，由模板指导), 形成转录起始复合物 σ亚基脱落（参与下一轮转录） 由核心酶(α2ββ)催化链的延伸 第一个总是GTP 全酶( σα2ββ )-DNA模板(启动子)-pppGpN-OH 3 5 DNA 5 3 DNA 起始点 RNA聚合酶 pppG pppN pppN 5pppGpN 转录起始时pppGpN-OH的生成 CN 3 5 模板链 ` CN 3 5 模板链 进一步延长 起始 2. 链的延长 转录起始时形成的“转录泡”仍保留 RNA链的延长由核心酶催化 核心酶沿模板链3→5方向移动，RNA链按碱基配对规律沿5→3方向延伸 新生链与模板链形成杂化双链(该杂化分子结构不稳定，RNA链游离后，DNA双链重新形成) 随“转录泡”和DDRP不断移动(