精品课程：基因突变幻灯片.ppt

当p16INK4基因失活而导致P16INK4蛋白不能正常表达时，一方面不能竞争结合CDK4或CDK6，阻止细胞分裂；另一方面，增加CyclinD与CDK的结合，进一步刺激细胞分裂，从而使细胞生长失去控制，向癌变发展。 在已普查过有将近300种癌细胞株中，INK基因家族最易发生纯合缺失，其次是点突变和甲基化修饰异常。 此外，在许多株黑色素细胞瘤细胞中，INK基因常出现无义突变和移码突变，这些特征表明INK基因突变与许多组织和细胞发生的肿瘤关系密切。 该基因最先在结肠癌细胞中分离得到，故称为结直肠癌缺失基因（DCC）。 DCC基因位于人染色体18q21.3区，长度约370kb，转录生成的mRNA约为10~12kb，编码的蛋白质含750个氨基酸残基，分子量190kD。 2.4 DCC Gene DCC蛋白为跨膜的磷酸化蛋白，与神经细胞粘附分子有同源性，编码导蛋白（netrin）受体，与轴突发育的引导功能有关。 DCC基因失活的主要原因是点突变、插入或5′-端纯合缺失，在直肠癌和结肠癌细胞中表达明显降低甚至消失。 2.5 BRCA1 Gene 乳腺癌易感基因（BRCA1）是遗传性乳腺癌／卵巢癌综合征的易感基因。 BRAC1基因的失活易导致乳腺癌／卵巢癌的发生。 1994年Skolnick研究小组克隆了BRCA1基因。 BRCA1基因由22个外显子组成，基因组DNA长 100 kb， mRNA全长7.8 kb，编码含 1863个氨基酸残基的蛋白。 最近的研究发现，BRCA1蛋白参与转录过程中DNA模板的损伤修复过程。 DNA损伤诱导BRCA1与BARD1（BRCA1-associated RING domain protein 1）形成复合物，并与RNA聚合酶结合，促使转录停滞，触发泛素连接酶与RNA聚合酶结合并使之降解；BRCA1与受损部位结合，召集DNA修复因子，促使DNA的损伤部位得以修复。 Mechanism of BRCA1 Taking Part in DNA Repair BRCA1基因的突变大部分是移码突变和无义突变。 BRCA1基因的失活符合抑癌基因失活的二次打击模式，即在生殖细胞中的一个等位基因由于缺失或突变而失活，当体细胞中另一个正常的等位基因再发生缺失或突变而失活时，则可使基因功能丧失，从而导致肿瘤的发生。 Ph1 Chromosome in CML Cells 3.2 Proto-oncogene Amplification 基因扩增引起原癌基因拷贝数目增加，导致染色体结构异常，常形成双微染色体（DM）或染色体均染区（HSR），其机制不明。 DM and HSR B. homogeneous staining region（HSR） A. double minute chromosome（DM） 基因扩增常常导致原癌基因表达增强而被激活，常见于myc家族原癌基因。 3.3 Alternation of Proto-oncogene Methylation 在肿瘤细胞中可发现原癌基因的甲基化修饰改变，表现为原癌基因的低甲基化或去甲基化而被激活。 如在胃癌细胞中发现了c-Ha-ras癌基因的低甲基化修饰，而低甲基化可导致c-Ha-ras癌基因的过度表达。 Section 2 Tumor Suppressor Gene 1. Discovery and Concept of Tumor Suppressor Gene 20世纪70年代初，在研究体细胞杂交时发现：肿瘤细胞与正常细胞进行融合，结果产生正常的杂交细胞。 这种现象表明，在正常细胞中含有抑制肿瘤生长，调节细胞正常生长的物质。 1.1 Discovery of Tumor Suppressor Gene 1985年，Cavence等从两个患遗传性视网膜母细胞瘤家族中，发现肿瘤细胞缺失了位于13q14区的Rb基因，且当Rb基因为纯合子时就会诱发肿瘤，从而首次发现并证实了抑癌基因。 抑癌基因（tumor suppressor gene），又称抗癌基因（anti-oncogene）、肿瘤易感基因或隐性癌基因，是一类存在于正常细胞中，其编码产物能抑制细胞生长增殖的基因。 由于这类基因的缺失、突变或甲基化引起的失活，最终导致肿瘤的发生。 1.2 Concept of Tumor Suppressor Gene 目前已被人们认识和克隆的抑癌基因有40多种，可分为两大类： 抑制细胞增殖的抑癌基因； 参与DNA损伤修复的抑癌基因。 抑制细胞增殖的抑癌基因 Rb —— retinoblastoma gene； p53 —— P53 gene； p21Waf1/Cip1 —— wild type p53-activated fragment 1／CDK-inte