培养基灭菌 空气灭菌幻灯片.ppt

培养基灭菌 空气除菌 姚璐晔 第一节 培养基灭菌 灭菌的概念 灭菌的方法 湿热灭菌的原理 分批灭菌设计 连续灭菌设计 微生物的热死动力学 灭菌的概念 灭菌的概念 消毒是指用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物。一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。 例如，巴氏消毒法，是将物料加热至60℃维持30min，以杀死不耐高温的微生物营养细胞。 灭菌是用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。 消毒不一定能达到灭菌要求，而灭菌则可达到消毒的目的。 灭菌的概念 防腐就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。 （1）低温 （4）高渗 （2）缺氧 （5）高酸度 （3）干燥 （6）防腐剂 灭菌的方法 化学药物灭菌 射线灭菌 空气的过滤除菌 加热灭菌 化学灭菌法 甲醛、乙醇或新洁尔灭、高锰酸钾等 适用范围：环境、皮肤及器械的表面消毒 射线灭菌 电磁波、紫外线或放射性物质 适用范围：无菌室、接种箱 过滤除菌法 利用过滤方法阻留微生物 适用范围：制备无菌空气 加热灭菌法 湿热灭菌法 (高压蒸汽) 利用饱和蒸汽灭菌，条件：121℃，30min 适用范围：生产设备及培养基灭菌 干热灭菌法 常用烘箱，灭菌条件：160℃下保温1h 适用范围：金属或玻璃器皿 火焰灭菌法 火焰 适用范围：接种针、玻璃棒、三角瓶口 湿热灭菌 湿热灭菌原理：蒸汽具有很强的穿透能力，在冷凝时会放出大量的冷凝热，很容易使蛋白质凝固而杀死各种微生物。 灭菌条件： 121℃，30min 灭菌不利方面：同时会破坏培养基中的营养成分，甚至产生不利于菌体生长的物质。 分批灭菌（间歇灭菌） 将配制好的培养基同时放在发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程，也称实罐灭菌。 连续灭菌 将培养基在发酵罐外通过连续灭菌装置进行加热、保温和冷却而进行灭菌。 连续灭菌 （1）配料预热罐，将配制好的料液预热到60?70 ℃ ，以免连续灭菌时由于料液与蒸汽温度相差过大而产生水汽撞击声； （2）连消塔，用高温蒸汽使料液温度很快升高到灭菌温度（126?132℃ ）； 连续灭菌 （3）维持罐，使料液在灭菌温度下保持5?7min。因为：连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的灭菌是不够的； （4）冷却管，使料液冷却到40?50℃后（冷水喷淋） ，输送到预先灭菌过的罐内。 连续灭菌 连续灭菌 连续灭菌 间歇灭菌与连续灭菌的比较 微生物的热死动力学 微生物受热死亡的主要原因是高热能使蛋白质变性，这种反应可认为是单分子反应，死亡速率可视为一级反应，即与残存的微生物数量成正比。 微生物的热死动力学 微生物的热死动力学 实验证明，细菌孢子的热死灭动力学与营养体细胞显著不同。 对于耐热性的微生物芽孢， 存在“菌体循序死亡模型”假说，认为：芽孢的死亡是渐进的。有耐热的芽孢（R型）转变为死亡的芽孢（D型），需经过敏感的中间过程（S型）。 微生物的热死动力学 微生物的热死动力学 例1：当杀菌温度从120℃升至150 ℃，试计算维生素B1的分解速率常数KB和嗜热脂肪芽孢杆菌的死亡速率常数KS。已知⊿ES=283460 J/mol, As=1.06×1036 (min-1) ；⊿EB=92114 J/mol, AB=1.06×1010 (min-1)解：由（1）式，即㏑K= ㏑ A－ (⊿E /RT)得 lnKs= ln As － ⊿ES /(RT) ∴ Ks在120 ℃时为0.0156 (min-1) 150 ℃时为7.54 (min-1)灭菌速率常数提高482倍。 同样地： KB在120 ℃时为0.00535 (min-1)，150 ℃时为0.040 (min-1)，同样的温度变化仅提高6.5倍。 1.杀灭芽胞最常用和最有效的方法是：____________。a.紫外线照射 b.煮沸5min c.巴氏消毒法 d.高压蒸气灭菌法2.下述不可能杀灭细菌芽胞的方法是： ____________。a.煮沸法 b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法 d.干热灭菌法e.高压蒸气灭菌法3.常用于空气或物体表面的消毒____________。a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 4.常用于基础培养基灭菌___________