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闫 志 勇 青岛大学医学院微生物学教研室 * * 实验3. 链球菌属 青岛大学医学院医学检验系 可疑菌落,观察溶血情况 γ溶血 β溶血 α溶血 Optochin 肺炎链球菌 胆汁七叶苷 + — 6.5% NaCl 草绿色链球菌 + — + — 肠球菌 非肠球菌 A 群 杆菌肽S cAMP+ B 群 胆汁七叶苷 + 均(—) D 群 其他链球菌 实验材料 一、菌种: A、B、D群链球菌,肺炎链球菌,草绿色链球菌。 二、培养基: 血平板 5枚/组 血清肉汤管 2支/组 三、生化管: 胆汁七叶苷、血清菊糖、高盐各2支/组 四、其他: 镊子、玻片、3%H2O2 optochin、杆菌肽纸片, 金黄色葡萄球菌 实验内容 一、形态观察: A、B、D群链球菌,肺炎链球菌,草绿色链球菌革兰染色。 二、培养物观察: 1. 菌落观察: A、B群链球菌,肺炎链球菌,草绿色链球菌接种血平板(BAP)。 2. 液体培养观察: 任取2种菌接种血清肉汤,观察生长情况。 (24h后取菌做革兰染色) 三、生化实验: 1. 触酶试验:3%H2O2 2. 生化试验: 1)杆菌肽敏感试验: A群、B群链球菌 2)胆汁七叶苷试验:草绿色链球菌、D群 3) cAMP 实验: A群、B群链球菌 4)高盐试验:草绿色链球菌 、D群链球菌 5)肺炎链球菌与草链球菌的鉴别: optochin敏感试验: 菊糖发酵试验:.????? 杆菌肽敏感试验: 0.04U杆菌肽(bacitracin)药敏纸片贴在涂布有待测菌的羊血琼脂平板上,35℃孵育过夜后,观察抑菌环以判断是否为敏感。化脓性链球菌为阳性,可与其他β溶血性链球菌区别。 cAMP实验 原理:无乳链球菌(B群)能产生cAMP因子,能促进金黄色葡萄球菌溶血能力,使其产生显著的协同溶血作用。 方法:先将金黄色葡萄球菌(ATCC25923) 沿直径划线接种,再沿该线垂直方向接种待测链球菌,两线不得相接,间隔约3~4mm。35℃孵育过夜,两种划线交界处出现箭头状溶血,即为阳性反应。本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验。 金葡 B链 *
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